DB37∕T 3031-2017 化妆品中斑蝥素的测定 液相色谱-质谱质谱法.docxVIP

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DB37

山东省地方标准

DB37/T3031—2017

化妆品中斑蝥素的测定液相色谱-质谱/质谱法

Determinationofcantharidinincosmetics—LC-MS/MSmethod

2017-10-25发布2017-11-25实施

山东省质量技术监督局发布

DB37/T3031—2017

I

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由山东省质量技术监督局提出。

本标准由山东省化妆品标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：山东省产品质量检验研究院、山东省食品药品检验研究院。

本标准主要起草人：周莉莉、崔玉花、高勇、李丽、张卉、祝建华、邹惠玲、许士明。

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化妆品中斑蝥素的测定液相色谱-质谱/质谱法

1范围

本标准规定了化妆品中斑蝥素的液相色谱-质谱/质谱测定方法。

本标准适用于化妆品中斑蝥素的检测。

本标准液相色谱-质谱/质谱法的检出限为0.05g/kg。

2原理

化妆品中的斑蝥素用甲醇超声提取，离心过滤，经正己烷脱脂，液相色谱-质谱/质谱法测定和确证，外标法定量。

3试剂与材料

除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。

3.1甲醇：色谱纯。

3.2正己烷。

3.3斑蝥素标准品（cantharidin，CAS号56-25-7，C10H12O4）：纯度≥99%。

3.4斑蝥素标准储备液：准确称取适量斑蝥素标准品，用甲醇（4.1）溶解并定容至刻度，配制成浓度为1mg/mL的标准储备液，冰箱冷藏保存。

3.5标准工作溶液：将标准储备液用甲醇-水（1+9）溶液分别稀释为0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、25μg/mL的系列标准溶液。冰箱冷藏保存。

4仪器和设备

4.1高效液相色谱-质谱仪：配有电喷雾离子源。

4.2分析天平：感量分别为0.0001g和0.01g。

4.3超声波清洗器。

4.4漩涡混合器。

4.5离心机，大于6000r/min。

4.6微孔滤膜：0.22μm有机相过滤膜。

5测定步骤

5.1样品处理

称取化妆品试样1.0g（精确至0.01g）于30mL离心管中，加入5mL甲醇旋涡1分钟，超声提取10min，6000r/min离心5分钟后取上层清液。残渣加入5mL甲醇重复提取一次，合并上清液。加入4mL正己烷，振荡萃取20分钟后弃去正己烷层，从下层清液中取1.0mL于10mL刻度管中，用水定容至10mL刻度，旋

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涡混匀，过微孔滤膜（5.6），供液相色谱-质谱/质谱仪测定。对斑蝥素含量较高的样品，适当稀释后进样。

5.2测定

5.2.1液相色谱参考条件

以下为液相参考条件：

a)色谱柱：C18柱，100mm×2.1mm（i.d.），1.7μm，或相当者；

b)流动相：甲醇-水，梯度洗脱程序见表1；

表1流动相梯度洗脱程序

时间/min

甲醇/%

水/%

0

10

90

1

10

90

3

30

70

5

100

0

6

100

0

6.1

10

90

8

10

90

c)流速：0.3mL/min；

d)柱温：30℃;

e)进样量：5μL。

5.2.2质谱参考条件

以下为质谱参考条件：

a)离子源：电喷雾离子源；

b)扫描方式：负离子扫描；

c)毛细管电压：3.0kV；

d)锥孔电压：35V；

e)离子源温度：110℃;

f)脱溶剂气温度：450℃;

g)脱溶剂气（N2）流量：800L/h；

h)锥孔气（N2）流量：50L/h；

i)碰撞室压力：3.0×10-3mbar；

j)扫描方式：多反应监测（MRM）；m/z195/151（定量离子，碰撞能量12eV）、195/122（碰撞能量20eV）。

5.2.3液相色谱串联质谱测定

根据试样中被测样液的含量情况，选取斑蝥素的响应值在仪器线性响应范围内的浓度进行测定，如

超出仪器线性响应范围应进行稀释。在上述色谱条件下斑蝥素的参考保留时间为4.10min，标准溶液的多反应监测（MRM）色谱图参见附录A中的图A.1。

5.2.4液相色谱-质谱/质谱确证

3

按照按照液相色谱-串联质谱条件测定样品和标准工作溶液，样品中斑蝥素的保留时间与标准