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第3章消毒与灭菌DisinfectionandSterilization主讲教师：朱翠明

1、消毒（disinfection）杀灭物体上或环境中的病原微生物、并不一定杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。消毒剂（disinfectant）：用以消毒的药品2、灭菌（sterilization）杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀灭细菌芽胞、病毒和霉菌在内的全部病原微生物和非病原微生物。第一节消毒灭菌的常用术语

防腐（antisepsis）清洁（cleaning）防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。防腐剂（antiseptic）：用以防腐的药物。

无菌（asepsis）不存在活菌的意思，多是灭菌的结果。无菌操作(aseptictechnique)防止细菌及其他微生物进入人体或其他物品的操作技术。

消毒、灭菌的方法一般可分为：01物理方法02化学方法03热力灭菌法04辐射杀菌法05滤过除菌法06干燥和低温抑菌法等07第二节消毒灭菌的方法

湿热灭菌法电离辐射微波紫外线滤过除菌法干热灭菌法辐射杀菌法热力灭菌法123456一、物理消毒灭菌法

㈠热力灭菌法1、干热灭菌法①焚烧

②烧灼

③干烤④红外线烤箱160~170℃2h170℃15℃170℃15℃170℃20℃

2、湿热灭菌法：①巴氏消毒法（pasteurization）：61.1~62.8℃30min或71.7℃15~30s用于酒类、牛奶的消毒。②煮沸法2%碳酸氢钠100℃，5-10min；加入2%碳酸氢钠沸点为105℃,防金属物品生锈。

③流动蒸汽消毒法100℃，15-30min④间歇蒸气灭菌法100℃，15-30min，37℃过夜（3次）

用于一般培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿物品的灭菌。103.4kPa（1.05kg/cm2)（121.3℃，维持15-20min）⑤高压蒸汽灭菌法灭菌效果最好。

同一温度，湿热好于干热潜热②穿透力大①菌体蛋白易凝固③水由气态变为液态时释放潜热

紫外线:01紫外线02DNAT-T二聚体03波长:240-300nm，265-266nm最强04DNA不能复制与转录05变异与死亡06㈡辐射杀菌法

紫外线杀菌特点：穿透力弱；只能杀死细菌的繁殖体，不能杀死细菌的芽胞。常用于空气或不耐热物品的表面消毒。123

微波电离辐射:包括β射线和γ射线机制：干扰DNA的合成、破坏细胞膜、产生H2O2等特点：穿透力强，不升高温度;用途：大量一次性医用塑料制品、食品、药品、生物制品的消毒。

低温：保存菌种。常用冷冻真空干燥法。滤过除菌法:使用孔径0.22μm或0.45μm的滤膜。用于血清、毒素、抗生素、空气等的除菌。但不能除去病毒、支原体、衣原体和有些L型细菌。干燥与低温抑菌法:干燥法：保存食物

化学消毒灭菌法杀菌机制促进菌体蛋白变性或凝固干扰细菌酶系统及代谢损伤菌细胞膜

根据杀菌能力分类高效消毒剂范围:杀灭所有微生物（包括芽胞）适用：不耐热，但要进入人体内部物品中效消毒剂范围:杀灭细菌繁殖体、真菌及大多数病毒适用：不耐热，但要进入人体带菌部位物品低效消毒剂范围:杀灭多数细菌繁殖体、部分真菌及病毒适用：物体及机体表面

医疗器械物品的消毒灭菌室内空气消毒灭菌：紫外线、滤过除菌；化学消毒剂喷雾、熏蒸手和皮肤消毒：75%乙醇、2%碘酊、0.5%洗必泰黏膜消毒：3%H2O2、0.1%高锰酸钾等、0.5%洗必泰饮水：氯气、漂白粉病人的排泄物：等量的20%漂白粉、5%石炭酸或2%来苏儿搅拌均匀，作用2小时第三节消毒灭菌的运用

第四节影响消毒灭菌效果的因素1、微生物种类；2、微生物的物理状态；3、微生物的数量；4、消毒剂性质、浓度与作用时间；多数：高浓度杀菌作用强大乙醇例外：70-75％最好5、温度：温度升高提高消毒效果6、pH；7、有机物。

分类微生物种类第一类指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。第二类指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。第三类第三类是指能够引起人或动物疾病，但一般情况下对人、动物或环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。第四类第四类是指在通常情况下不会引起人或动物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。第五节病原微生物实验室生物安全第一类和第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。一、病原微生物的分类自学

病原微生物实验室的分级级别处