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Heparin预装柱(FF)地址：市浦东新区科技园路720号2号
（Novoprotein号：R005）：，邮箱：product@
原理
肝素是一种含硫酸酯的酸性多糖，将它偶联到交联及活化的琼脂糖凝胶上，该填料具有很高
的化学稳定性。肝素能和抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干扰素、
结合蛋白、限制内切酶、凝血酶及类凝血酶等生物大分子结合，所以肝素琼脂糖凝胶可
以用于这类物质的纯化。
图为含有交互转换的抗坏血酸的肝磷脂多糖的结构（A）和D-葡萄糖残基（B）
柱床参数
柱床体积结合能力推荐工作流最大流速
速
Heparin2mg/ml牛抗1ml/min4ml/min
Sepharose6凝血酶III
FastFlow1ml
分离操作
结合缓冲液：20mMTris-HCl,pH8.0或者10mM磷酸钠,pH7.0
洗脱缓冲液：20mMTris-HCl,1~2MNaCl,pH8.0或者10mM磷酸钠,1~2MNaCl,pH7.0
1，用10倍柱体积的结合缓冲液平衡柱子。
2，上样。
3，用5-10倍柱体积的结合缓冲液平衡分离柱，直到基线，即所有未结合物质都被冲洗出柱
子。紫外吸光A280nm处。
4，用5-10倍柱体积的洗脱缓冲液进行洗脱。使用连续的或者阶梯式的梯度洗脱，洗脱缓冲
液的浓度从0%-100%。
使用注意
1，通过改变缓冲液的pH值或者离子强度来修饰肝磷脂的选择性。洗脱时使用连续的或者
阶梯式的洗脱方式，用NaCl,KCl或者硫酸铵溶液，浓度可以高达1.5~2M。
2，对于凝血因子而言，肝磷脂作为亲和配基，在结合缓冲液中含有一个低浓度的0.1M的
Heparin预装柱(FF)地址：市浦东新区科技园路720号2号
（Novoprotein号：R005），邮箱：product@
NaCl是合适的。
3，如果增加盐离子浓度的梯度产生一个令人不满意的结果，使用肝磷脂（1~5mg/ml）在洗
脱缓冲液中竞争性试剂
净化
1，用0.5个柱体积的2M的NaCl冲洗10分钟去除离子键结合蛋白。
2，通过用4倍柱体积的0.1MNaOH溶液冲洗柱子1~2小时去除沉淀物或变性蛋白或用2
倍的柱体积的6M的盐酸胍冲洗柱子30~60分钟，或者用2倍柱体积的6M的尿素冲洗
30~60分钟。
3，用4倍柱体积的0.1%~0.5%的TritonX-100冲洗1~2小时，去除疏水键结合的蛋白质。
填料性质及化学稳定性
产品组成配基密度pH稳定性平均颗粒尺寸
肝素Sepharose6肝素偶联到Sepharose5mg/ml短期3-1290μm
FastFlow6FastFlow，通过还原
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