慧眼识菌革兰氏染色96课件.pptxVIP

慧眼识“菌”

—革兰氏染色

目录

CONTENTS

认识革兰氏染色

菌种鉴定方法

形态分析法：革兰氏染色、芽孢染色、

生理生化法

食品安全涉及人类最基本权利的保障。

分子生物学法

形态分析法

革兰氏染色法

普通染色法

芽孢染色法

细菌生化反应

触酶试验

凝固酶试验

胆汁溶菌试验

氧化/发酵试验

氧化酶试验

苯丙氨酸脱氨酶试验

硝酸盐还原试验

糖发酵试验

吲哚试验（靛基质试验）

甲基红试验

V-P（Voges-Proskauer）试验

枸橼酸盐（或柠檬酸盐）利用试验

克氏双糖铁（KIA）复合试验

动力、吲哚及脲酶（MIU）复合试验

分子生物学

细菌：16sRNA

真菌：18sRNA、ITS序列

认识革兰氏染色

细菌

污染食品和引起食品腐败变质的主要微生物类群。

革兰氏染色

保证细菌鉴定结果的首要工作。

认识革兰氏染色

革兰氏染色法是细菌学中使用最广泛的一种染色方法，由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰（HansChristianGram）于1884年所创立。

经革兰氏染色后，可将细菌分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）。

革兰氏染色法在鉴别细菌、研究细菌的致病性等发面具有极其重要的意义。

革兰氏染色实验

实验讲解

实验材料

实验操作

实验原理

一、实验材料

二、实验操作

1.操作流程

二、实验操作

2.操作步骤

（1）.涂片

A.加小滴水

B.涂成薄层

C.固定菌体

涂片制备过程

二、实验操作

2.操作步骤

（2）.染色

结晶紫初染1min

碘液媒染1min

95%酒精脱色20s～30s

蕃红复染1min

细水

冲洗

细水

冲洗

细水

冲洗

细水

冲洗

涂片染色过程

二、实验操作

2.操作步骤

（3）.镜检

阳性G+

阴性G-

二、实验操作

3.注意事项

二、实验操作

4.操作演示

三、实验原理

与细菌细胞壁的结构和化学组成有关。

三、实验原理

G+细菌与G－细菌细胞壁的比较

结构

化学组成

肽聚糖

磷壁酸

脂溶性物质

G+

一层

厚

多

含量较高

少

G－

两层

薄

少

无

多

三、实验原理

a、用紫色染料

结晶紫染色

b、用碘液媒染

c、用酒精脱色

d、用番红花红复染

三、实验原理

空隙

染料

脱色结果

G+

变小

难流出

保留紫色

G－

变大

易流出

无色

G+细菌与G－细菌细胞壁脱色过程中的变化

结果：G+（紫色），G－（红色）

课堂总结

回顾总结

a、用结晶紫染色

b、用碘液媒染

c、用酒精脱色

d、用番红复染

1.革兰氏染色常用于细菌的鉴别。

2.革兰氏染色的主要步骤。

初染

媒染

脱色

复染

回顾总结

与细菌细胞壁的结构和化学组成有关。

3.革兰氏染色的注意事项。

4.革兰氏染色的实验操作。

5.革兰氏染色原理。

载玻片、无菌水和取菌量、涂片、加热固定、水洗等环节。

凃片媒染脱色复染镜检结果判断

课堂提问

有位同学在实验操作中将本是G+的金黄色葡萄球菌染成了红色，请你帮他分析可能造成的原因有哪些？

课下思考

革兰氏染色常用于细菌鉴别，仅通过革兰氏染色就能对细菌进行准确鉴定吗？

谢谢聆听