液液分配色谱法liquidliquidpartitionc.pptx

农用化工产品品质检验液相色谱知识点之——（液液）分配色谱法（liquid-liquid）partitionchromatography制作者：徐瑾

概述1以分散在很细的惰性载体或硅胶上的液体作为固定相（固定液），作为固定相的液体与流动相互不相溶，利用被分离组分在两相间的分配系数（k）不同进行分离的方法。分配色谱法的定义惰性载体inertcarrier硅胶silicagel;silicone分配系数partitioncoefficient互不相溶immiscibleThemostwidelyusedtypeofHPLCispartitionchromatographyinwhichthestationaryphaseisasecondliquidthatisimmisciblewiththeliquidmobilephase.

概述2分配色谱法的分类Partitionchromatographycanbesubdividedintoliquid-liquidandliquid-bonded-phasechromatography.Thedifferencebetweenthetwoliesinthewaythatthestationaryphaseisheldonthesupportparticlesofthepacking.Theliquidisheldinplacebyphysicaladsorptioninliquid-liquidchromatography,whileitisattachedbychemicalbondinginbonded-phasechromatography.Earlypartitionchromatographywasexclusivelyliquid-liquid;now,however,bonded-phasemethodspredominatebecauseoftheirgreaterstabilityandcompatibilitywithgradientelution.Liquid-liquidpackingsaretodayrelegatedtocertainspecialapplications.液液分配色谱liquid-liquidchromatography固定液机械涂覆在载体（硅胶）表面键合相色谱liquid-bonded-phasechromatography通过化学反应把各种不同基团键合到载体（硅胶）表面的游离基上

概述3分配色谱的固定液对被分离组分是一种很好的溶剂。当被分析的样品进入色谱柱后，各组份按照他们各自的分配系数，很快地在两相间达到分配平衡。这种分配平衡的总结果导致各组份迁移速度的不同，从而实现了分离。很明显，分配色谱法的基本原理与液液萃取相同，都是分配定律。分配色谱法的分离原理分配平衡partitionequilibrium分离separation液液萃取liquid-liquidextraction分配定律partitionlaw

固定相与流动相4固定相载体 载体（又称担体），仅起负载一定量固定液的作用，它必须是惰性材料；不溶于固定液和流动相，也不与他们起任何化学反应，有较大的表面积（superficialarea），机械强度（mechanicalstrength）好。常用的载体如吸水硅胶、纤维素（cellulose）、多孔硅藻土（macroporousdiatomaceous）和微孔聚乙烯小球（Microporouspolyethyleneball）等。固定液 在液液分配色谱中常用的固定液有乙二醇、乙二胺、二甲基亚砜、硝基甲烷、甲基硅烷、正庚烷及聚烯烃等等。

固定相与流动相5流动相分配色谱法的流动相种类较多，水、不同pH的溶液、缓冲溶液和不同极性的溶剂均可用作流动相。对流动相的要求1）与固定液不互溶（immiscible），极性（polarity）相差较大；2）对样品组分的溶解度（solubility）足够大，又相对小于固定液对组分的溶解度。

液液分配色谱的分类6正相分配色谱Normal-phasechromatography固定相的极性大于流动相的极性使用的流动相类似于液固色谱中使用极性吸附剂时应用的流动相。此时流动相主体为己烷、庚烷，可加入20%的极性改性剂，如1-氯丁烷、异丙醚、二氯甲烷、四氢呋喃、氯仿、乙酸乙酯、乙醇、乙