生化制品检测技术胃蛋白酶的检测60课件.pptxVIP

生化制品检测技术胃蛋白酶的检测60课件.pptx

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生化制品检测技术胃蛋白酶的检测

3胃蛋白酶的质量检测

(一)质量检查中国药典规定:本品系自猪、羊或牛的胃粘膜中提取的胃蛋白酶。每1g中含胃蛋白酶活力不得少于3800单位。1.性状:本品为白色或淡黄色的粉末;无霉败臭;有引湿性;水溶液显酸性反应。2.鉴别:取本品的水溶液,加鞣酸、没食子酸或多价重金属盐的溶液,即生成沉淀。3.干燥失重:取本品,在100℃干燥4h,减失重量不得过5.0%。胃蛋白酶的质量检测

(二)酶活力测定1.对照品溶液的制备精密称取经105℃干燥至恒重的酪氨酸适量。加盐酸溶液(取1mol/L盐酸溶液65mL,加水至1000mL)制成每1mL中含500μg的溶液。2.供试品溶液的制备取本品适量,精密称定,用上述盐酸溶液制成每1mL中约含0.2~0.4单位的溶液。胃蛋白酶的质量检测

(二)酶活力测定3.测定法取试管6支,其中3支各精密加入对照品溶液1mL,另3支各精密加入供试品溶液1mL,置37士0.5℃水浴中,保温5min,精密加入预热至37士0.5℃的血红蛋白试液5mL,摇匀,并准确计时,在37士0.5℃水浴中反应10min。立即精密加入5%三氯醋酸溶液5mL,摇匀,滤过,取滤液备用。另取试管2支,各精密加入血红蛋白试液5mL,置37士0.5℃水浴中,保温10min,再精密加入5%三氯醋酸5mL,其中1支加供试品溶液1mL,另一支加上述盐酸溶液1mL,摇匀,滤过,取续滤液,分别作为供试品和对照品的空白对照。照分光光度法,在275nm波长处测吸收度,算出平均值和,按下式计算:胃蛋白酶的质量检测

式中:为对照品的平均吸收度;为供试品的平均吸收度;Ws为对照品溶液每1mL中含酪氨酸的量,μg;W为供试样品取样量,g;n为供试样品稀释倍数。在上述条件下,每分钟能催化水解血红蛋白生成1μmol酪氨酸的量,为1个蛋白酶活力单位。胃蛋白酶的质量检测

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