唾液（斑）检验教学课件.pptVIP

第十四章唾液（斑）检验一、??????????唾液（斑）的特点唾液来源：唾液腺的分泌物---腮腺、颌下腺、舌下腺、小唾液腺浆液粘液唾液成分：水分占99.4%，有机物---粘/球蛋白质、氨基酸、尿素、尿酸、唾液淀粉酶、麦芽糖酶、血型物质无机物---钠、钾、氯、钙、铵、磷酸盐、碳酸盐、硫氰酸盐其余为固形物（口腔脱落上皮细胞、大量细菌、食物残渣）唾液性状：无色、无味、接近中性（ph6.6-7.1），低渗粘蛋白多的时候呈粘液状，粘蛋白少的时候较稀薄唾液分泌：正常成年人每天分泌唾液1.0-1.5L。一、唾液（斑）的证明淀粉酶+口腔黏膜上皮细胞理由：唾液中含有大量的淀粉酶，是进行唾液斑斑痕种类鉴定的依据之一，但淀粉酶分布极广（人类粪便、几乎所有的植物、真菌等都含有淀粉酶、人体的其他分泌液液含少量的淀粉酶），单纯检出淀粉酶不能确定唾液斑。方法：淀粉酶检测：淀粉+碘-----蓝色（-）不含淀粉酶淀粉酶（检材）糖+碘-----无色（+）可能是唾液+碱性铜------棕红色沉淀证明糖的存在上皮细胞：检材—离心----涂片----HE染色如果检出食物残渣，更支持是唾液斑的检测结论三、唾液斑的遗传标记检测ABO血型----漱口，自然流出唾液置于干净容器，水浴中煮沸10min。灭火血型分解酶分泌型人的唾液斑-----中和试验测定ABO血型非分泌型人的唾液斑----酶标抗体免疫测定的方法蛋白/酶型----可以用特殊的双环杯提取腮腺液多态性蛋白Pa腮腺酸性蛋白Pb腮腺碱性蛋白Pn腮腺中性蛋白Pm腮腺中带蛋白Ph腮腺重蛋白Pr唾液富含脯氨酸蛋白Db唾液双带蛋白GL唾液糖蛋白、多态性酶唾液淀粉酶、唾液酯酶、唾液酸性磷酸酶、唾液过氧化物酶等DNA分析----唾液中含有口腔粘膜脱落上皮细胞---提取DNA---基因组DNA/线粒体DNA唾液：漱口水或口腔式子，提取DNA唾液斑：烟蒂（注意：取有唾液的部分进行DNA提取）四、唾液（斑）的性别鉴定分子杂交---男性特有的Y染色体DNA片断作为探针检测性别特异性高、但费时耗力、对DNA的含量及其完整性要求较高PCR技术---性染色体特异性片断---片断的有无性染色体同源性片断---片断的数目ZFP----锌指状蛋白基因：5’ZFYX+3’ZFY/ZFX，男340，女488AMG--牙釉质蛋白基因：根据碱基缺失部位两侧的同源序列设计引物唐朝的衰落和灭亡渔阳鞞鼓动地来，惊破霓裳羽衣曲——《长恨歌》高力士宦官专权第一阶段批阅奏折别以为你是当朝宰相，你呈上来的奏折还得让我批准呢！李辅