《马铃薯黑胫病室内抗性鉴定技术规程》DB15T 4106-2025.docxVIP

ICS65.020.01CCSB16

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内蒙古自治区地方标准

DB15/T4106—2025

马铃薯黑胫病室内抗性鉴定技术规程

Codeofpracticetechnicalforindoorevaluationofpotatoresistancetoblacklegdisease

2025-07-10发布2025-08-10实施

内蒙古自治区市场监督管理局发布

DB15/T4106—2025

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前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由内蒙古自治区果蔬标准化技术委员会（SAM/TC25）归口。

本文件起草单位：内蒙古农业大学、内蒙古自治区农牧业科学院、准格尔旗农牧局。

本文件主要起草人：孙平平、李正男、张磊、席先梅、雷雪峰、黄秀梅、杨永青、廉勇、付崇毅、霍宏丽、张溪、王金泉、牟英男、吴若晨。

DB15/T4106—2025

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马铃薯黑胫病室内抗性鉴定技术规程

1范围

本文件规定了马铃薯黑胫病室内抗性鉴定的术语和定义、培养基制备、接种体制备、接种、病情调查和抗病性评价等内容。

本文件适用于马铃薯品种在室内条件下对黑胫病抗性水平的鉴定。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4培养基制备

LBA培养基（病原细菌生长固体培养基）：5g酵母提取物，10g胰蛋白胨，10g氯化钠，15g琼脂粉，1000mL去离子水，121℃灭菌15min。

LB液体培养基（病原细菌生长液体培养基）：不加琼脂粉，其余同LBA的制作方法。

5接种体制备

病原物分离

取马铃薯黑胫病感病植株，采用组织分离结合单孢分离法从发病部位分离病原物，柯赫氏法则确定致病菌，形态学、生理生化特性和分子序列对致病菌株进行鉴定，确定为马铃薯黑胫病病原菌Pectobacteriumatrosepticum，保存备用。

菌悬液的制备

取100μL在-80℃保存的分离病原菌涂抹于LBA培养基上，28℃培养48h。挑取菌落于100mLLB液体培养基中，置于28℃、180r/min培养48h，用无菌水调节菌悬液浓度至106cfu/mL。

鉴定材料准备

选择形态完好、无明显伤病的马铃薯种薯，种植在装有无菌的细沙与腐殖土等量混匀的盆中，出苗后在温室环境下生长。采用随机排列盆栽，待马铃薯植株高约10cm用于接种。

6接种

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用无菌牙签在距土壤表面约5cm处戳伤植株的茎部，吸取10μL菌悬液，注射于马铃薯植株茎部伤口中，以接种等量LB培养基的处理作为对照，每个品种处理10株，重复3次，将接种植株置于25℃~

28℃和90%以上湿度环境条件下培养。

7病情调查

接种7天后，以接种点为中心测定上下各5cm范围内的发病面积占调查面积的比率进行分级和抗性评价。

8抗病性评价

计算抗病等级平均值，以抗病等级平均值评价抗病性：

——调查范围内无病状发生，抗病等级为高抗（HR）；

——发病面积占调查面积25%以下，抗病等级为抗病（R）；

——发病面积占调查面积25%～50%，抗病等级为中抗（MR）；

——发病面积占调查面积50%～75%，抗病等级为中感（MS）；

——发病面积占调查面积75%～100%，抗病等级为高感（HS）。