T_HTCMA 083-2022 河南道地药材 红花组织培养育苗技术规程.docxVIP

团体标准

T/HTCMA083－2022

河南道地药材红花组织培养育苗技术规程

Henandao-diherbs-TechnicalSpecificationfortissuecultureofSafflowerseedling.

2022-11-01发布2023-01-01实施

河南省中药材协会发布

目次

前言 I

红花组织培养育苗技术规程 1

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语与定义 1

4设施设备 2

5组织培养 2

6温室驯化 3

I

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》、国家标准化管理委员会、民政部的《团体标准管理规定》、河南省中药材协会的《团体标准管理办法（试行）》及其它团体标准管理的规定起草。

本文件的全部技术内容为推荐性。

本文件由河南省农业科学院中药材研究所提出。

本文件由河南省中药材协会、河南省农学会中药材专业委员会归口。

本文件由河南省农业科学院中药材研究所起草。

本文件起草人员：梁慧珍、苏小雨、孙瑶、许兰杰、谭政委、杨青、余永亮、李春明、杨红旗、李磊、安素妨、鲁丹丹、董薇。

本文件知识产权属于河南省农业科学院中药材研究所，负责解释并组织实施。

1

红花组织培养育苗技术规程

1范围

本标准规定了红花组织培养育苗的术语和定义、设施设备、组织培养和温室驯化。

本标准适用于组织培养育苗的术语和定义、设施设备、组织培养和温室驯化。

2规范性引用文件

下列文件所包含的条款，通过在本标准中引用而构成为本标准的条款。凡不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

LY/T1882—2010林木组织培养育苗技术规程

3术语与定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1道地药材

道地药材是优质药材的专用名词，是指历史悠久、品种优良、产量较大、加工炮制规范、疗效突出，带有明显地域特点的中药材。

3.2红花

红花（CarthamustinctoriusL.）为菊科经济植物。

3.3组织培养

在无菌条件下，将离体的红花幼嫩胚根等作外植体在人工培养基和人工控制的环境中，使其再生新植株的过程和技术。

3.4愈伤组织诱导培养

在组织培养过程中，最初建立的外植体无菌培养阶段。

3.5诱导分化培养

将初代培养获得的愈伤组织，通过分离切割接种在分化苗培养基培养中，从而获得无菌幼苗的培养阶段。

2

4设施设备

4.1组织培养设施设备

4.1.1基本要求

组织培养室包括洗涤室、灭菌室、培养基配制室、缓冲室、无菌接种室和无菌培养室等。

4.1.2洗涤室设备

配备自动或半自动洗瓶机、水槽、收纳箱、量瓶架等。

4.1.3灭菌室设备

配备高压蒸汽灭菌锅、器械消毒器、紫外线灯、烘干箱、微孔过滤器等。

4.1.4培养基配制室设备

配备万分之一电子天平、酸度计、微波炉、冰箱等。

4.1.5缓冲室设备

配备衣帽柜、风淋装置等。

4.1.6无菌接种室设备

配备超净工作台、器械消毒器、酒精灯等。

4.1.7无菌培养室设备

配备培养架、紫外灯、臭氧发生器、空气加湿器、除湿机、时控装置等。

4.2温室驯化设施设备

配备温湿度调节装置、光照控制装置、灌溉设备、栽培床、穴盘等。

5组织培养

5.1外植体制备与灭菌

5.1.1外植体制备

挑选若干颗粒完整、饱满的红花种子，在室温下用洁净自来水浸泡24h。

5.1.2外植体灭菌

3

在超净工作台内，种子吸水充足后用无菌水冲洗2~3遍，将种子放入提前灭菌的组培空瓶中，先用75%乙醇消毒30s，无菌水冲洗3~5遍；再用0.1%HgCl2消毒处理20min，无菌水冲洗3~5遍。将处理好的种子用滤纸吸干表面水分，放入MS基本培养基中室温催芽。

5.1.3外植体取材

选取红花萌发后生长健壮、无病的胚根，截取长度为0.5cm～1cm的芽段。

5.2培养基成分

愈伤组织诱导与诱导分化所需培养基成分见附录A，培养基pH5.8。

5.3外植体的接种

将经过灭菌的芽段置于超净工作台内，无菌接种。

5.4愈伤组织诱导培养

外植体接种于300mL～650mL培养瓶中，每瓶分装培养基高度1.0cm～1.5cm，每10mL培养基接种1个芽段，置于无菌培养室中培养3周。

培养室设置在温度为23～25℃