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2025/07/22
抗体的制备方法与原理
汇报人:_1751850234
CONTENTS
目录
01
抗体的基本概念
02
抗体的制备方法
03
抗体的制备原理
04
抗体的应用领域
抗体的基本概念
01
抗体定义
免疫球蛋白的结构
抗体是免疫球蛋白的一种,具有Y型结构,由两条轻链和两条重链组成。
特异性结合抗原
抗体能够识别并特异性结合特定的抗原,这是其在免疫反应中的关键作用。
抗体的多样性
人体通过基因重排产生数以亿计不同特异性的抗体,以应对各种外来病原体。
抗体的功能
抗体的主要功能包括中和病原体、促进吞噬作用、激活补体系统等。
抗体的种类
免疫球蛋白G(IgG)
IgG是血清中最常见的抗体,能够穿过胎盘,为新生儿提供被动免疫。
免疫球蛋白M(IgM)
IgM是初次免疫应答中最早产生的抗体,通常以五聚体形式存在,具有强大的激活补体系统的能力。
抗体的制备方法
02
多克隆抗体制备
免疫动物
选择合适的实验动物,如兔子或小鼠,通过注射抗原多次免疫,激发其产生多克隆抗体。
血清收集
在免疫周期结束后,从动物体内采集血液,分离血清,血清中含有多种针对特定抗原的抗体。
抗体纯化
利用蛋白质A或G亲和层析等技术从血清中纯化出多克隆抗体,去除其他血清蛋白杂质。
单克隆抗体制备
融合细胞技术
通过将骨髓瘤细胞与免疫B细胞融合,产生能稳定分泌单一抗体的杂交瘤细胞。
筛选与克隆化
利用有限稀释法或软琼脂克隆化技术,从融合细胞中筛选出能产生特异性抗体的单克隆细胞。
基因工程抗体制备
克隆抗体基因
通过PCR技术克隆特定的抗体基因序列,为后续表达奠定基础。
表达载体构建
将克隆的抗体基因插入表达载体,构建用于生产抗体的工程菌或细胞系。
细胞培养与抗体表达
在适宜的培养条件下,工程细胞表达并分泌目标抗体,通过纯化步骤获得高纯度抗体。
抗体的制备原理
03
免疫反应原理
免疫球蛋白G(IgG)
IgG是血清中最常见的抗体,能穿过胎盘,为新生儿提供被动免疫。
免疫球蛋白M(IgM)
IgM是初次免疫应答中产生的主要抗体,具有较高的聚合形式,是早期感染的标志。
抗体识别与结合
免疫球蛋白的结构
抗体是免疫球蛋白的一种,具有Y型结构,由两条轻链和两条重链组成。
特异性结合抗原
抗体能够识别并特异性结合特定的抗原,这是其在免疫反应中的关键作用。
抗体的多样性
人体通过基因重排产生数以亿计不同特异性的抗体,以应对各种外来病原体。
抗体的功能
抗体的主要功能包括中和病原体、促进吞噬作用、激活补体系统等。
抗体的纯化技术
克隆抗体基因
通过PCR技术克隆特定的抗体基因序列,为后续表达奠定基础。
表达载体构建
将克隆的抗体基因插入表达载体中,构建用于生产抗体的工程菌或细胞。
细胞培养与抗体表达
在适宜的培养条件下,工程细胞表达并分泌目标抗体,通过纯化步骤获得高纯度抗体。
抗体的应用领域
04
医学诊断
免疫动物
选择合适的实验动物,如兔子或小鼠,通过多次注射抗原以激发其产生免疫反应。
血清分离
从免疫后的动物中采集血液,通过离心等方法分离出血清,血清中含有多种抗体。
抗体纯化
利用亲和层析等技术从血清中分离和纯化出多克隆抗体,以用于后续的实验研究。
疾病治疗
融合细胞技术
通过融合骨髓瘤细胞和免疫B细胞,产生能稳定分泌特定抗体的杂交瘤细胞。
筛选与克隆化
利用有限稀释法或软琼脂克隆技术筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞,并进行克隆化培养。
生物研究工具
01
免疫球蛋白G(IgG)
IgG是血清中最常见的抗体,能够穿过胎盘,为新生儿提供被动免疫。
02
免疫球蛋白M(IgM)
IgM是初次免疫应答中最早产生的抗体,通常以五聚体形式存在,具有强大的激活补体系统的能力。
THEEND
谢谢
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