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Ku70在慢性粒细胞白血病细胞中的表达、关联及潜在治疗意义研究

一、引言

1.1研究背景与目的

慢性粒细胞白血病（ChronicMyeloidLeukemia，CML）是一种起源于多能干细胞的肿瘤性增生性疾病，在白血病中占有一定比例。CML临床上以乏力，消瘦，发热，肝、脾、淋巴结肿大和骨痛为主要症状，严重影响患者的生活质量和生命健康。全球年发病率为1.6-2/10万，中国慢粒患者较西方更为年轻化，国内几个地区的流行病学调查显示慢粒中位发病年龄为45-50岁，而西方国家慢粒的中位发病年龄为67岁。

在CML的发病机制研究中，虽然已经取得了一定进展，如发现95%的患者骨髓中存在费城染色体（t9，22和ko34，ko11）以及bcrabl融合基因，但仍有许多未知的分子机制有待深入探索。近年来，随着对DNA损伤修复机制研究的不断深入，Ku70蛋白作为DNA损伤修复的关键蛋白之一，逐渐受到关注。

Ku70由XRCC6基因编码，通常与Ku80形成异二聚体，参与识别DNA双链断裂位点，起始非同源末端连接（NHEJ）通路修复断裂DNA。除此之外，Ku70还参与端粒维持、细胞凋亡调控；通过V（D）J重排影响免疫细胞发育；作为胞质DNA感受器，调控先天免疫中干扰素和促炎性细胞因子的产生；以及促进T细胞激活，增强与衰老相关的自身免疫性疾病。然而，目前关于Ku70在慢性粒细胞白血病细胞中的表达情况及其与CML发生、发展的相关性研究较少，Ku70在CML细胞中的具体作用机制也尚不明确。

本研究旨在深入了解Ku70在慢性粒细胞白血病细胞中的表达情况，通过分析Ku70与CML发生的相关性，探究Ku70在CML细胞中的作用及其潜在的治疗作用，为CML的发病机制研究提供新的理论依据，同时也为CML的临床诊断和治疗提供新的靶点和思路，以进一步提高CML患者的治疗效果和生存率，改善患者的生活质量。

1.2国内外研究现状

在国外，对Ku70蛋白的研究开展得相对较早，涉及多个领域，其中也包括在白血病方面的探索。有研究通过对多种白血病细胞系的分析，试图明确Ku70在白血病细胞中的基础表达情况，为后续深入研究其功能奠定基础。部分研究聚焦于Ku70在白血病发生过程中可能参与的信号通路，例如通过对Ku70基因敲除或过表达的白血病细胞模型进行研究，发现其可能影响细胞周期调控、细胞凋亡等相关信号通路，这为理解白血病的发病机制提供了新的线索。但针对Ku70在慢性粒细胞白血病细胞中表达及功能的研究，目前还不够系统和深入。

在国内，相关研究也在逐步开展。一些研究团队关注到Ku70在DNA损伤修复通路中对白血病细胞的影响，通过实验发现，在某些白血病细胞受到电离辐射或化疗药物作用后，Ku70的表达水平会发生变化，且这种变化与细胞对损伤的修复能力以及对化疗药物的敏感性相关。另有学者对Ku70与白血病细胞增殖、凋亡的关系进行研究，发现调节Ku70的表达可以在一定程度上影响白血病细胞的增殖速率和凋亡进程，这提示Ku70有可能成为白血病治疗的潜在靶点。但具体到慢性粒细胞白血病，对Ku70的研究主要集中在其与疾病分期、治疗效果的初步相关性分析上，对于Ku70在慢性粒细胞白血病细胞中的具体作用机制研究还处于起步阶段。

总体而言，国内外关于Ku70在肿瘤细胞中的研究逐渐增多，但在慢性粒细胞白血病领域，对Ku70的研究仍存在许多空白。特别是Ku70在慢性粒细胞白血病细胞中的表达模式、与疾病发展进程的内在联系，以及能否作为新的治疗靶点等方面，都有待进一步深入研究。

1.3研究方法与创新点

在样本采集方面，本研究将从多家医院血液科收集慢性粒细胞白血病患者的骨髓样本以及外周血样本，同时收集健康志愿者的相应样本作为对照。为确保样本的代表性和可靠性，会严格筛选样本，详细记录患者的临床资料，包括疾病分期、治疗史等。

检测方法上，采用免疫组织化学技术对骨髓组织切片中的Ku70蛋白进行定位和半定量分析，直观呈现Ku70在细胞中的表达位置和相对表达水平。运用蛋白质印迹（WesternBlot）技术，对骨髓细胞和外周血细胞中的Ku70蛋白进行定量检测，通过特异性抗体识别并结合Ku70蛋白，再利用化学发光等方法进行信号检测，获得准确的蛋白表达量数据。此外，还将借助实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）技术，对Ku70基因的表达水平进行定量分析，通过扩增Ku70基因的特定片段，根据荧光信号的强度来精确测定基因的表达量。

为深入探究Ku70在慢性粒细胞白血病细胞中的作用机制，会利用小分子化合物、