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基于微球的3D体外培养体系构建及其对骨肉瘤MG63细胞生物学行为影响的探究

一、引言

1.1研究背景与意义

在生物医学研究领域，细胞培养技术始终是关键的研究手段，为深入探索细胞的生理功能、疾病发生机制以及药物研发等提供了重要平台。传统的二维（2D）细胞培养技术，虽操作简便、成本较低且易于观察，在过去的科研工作中发挥了重要作用，但存在明显的局限性。在2D培养条件下，细胞呈单层贴壁生长，仅能与培养皿表面进行简单的相互作用，这种生长方式与细胞在体内复杂的三维环境中所处的状态相去甚远。体内细胞处于由细胞外基质、相邻细胞以及各种信号分子构成的三维立体环境中，细胞间通过多种方式进行紧密的通讯和相互作用，这种复杂的微环境对细胞的形态、增殖、分化、代谢以及基因表达等生物学行为有着深远的影响。而2D培养无法真实模拟这些体内环境因素，导致细胞在培养过程中逐渐失去原有的生理特性，实验结果与体内实际情况存在较大偏差，难以准确反映细胞在生理和病理状态下的真实行为，在一定程度上限制了生物医学研究的深入发展。

为了克服2D培养的局限性，三维（3D）体外培养体系应运而生。3D培养体系能够为细胞提供更接近体内环境的生长空间，使细胞在三维空间中与周围的细胞和基质进行自然的相互作用，形成更复杂的细胞间信号传导网络。在这种环境下，细胞可以呈现出更接近体内的形态和功能，其增殖、分化、代谢等生物学行为也更能反映真实情况。例如，在肿瘤研究中，3D培养的肿瘤细胞能够形成类似体内肿瘤组织的结构，包括肿瘤核心、增殖边缘和坏死区域等，更真实地模拟肿瘤的生长和发展过程。在药物研发领域，3D培养体系可以更准确地评估药物的疗效和毒性，为新药的开发提供更可靠的实验依据。因此，3D体外培养体系在生物医学研究中具有重要的意义，逐渐成为研究细胞生物学、疾病模型构建以及药物筛选等方面的重要工具，推动了生物医学研究向更深入、更精准的方向发展。

骨肉瘤是一种常见且恶性程度极高的原发性骨肿瘤，好发于青少年，其发病率在原发性恶性骨肿瘤中位居前列。骨肉瘤的发病机制极为复杂，涉及多个基因的突变和信号通路的异常激活。目前，临床上对于骨肉瘤的治疗主要采取手术切除联合化疗的综合治疗方案，但由于骨肉瘤具有易复发和早期转移的特性，患者的总体预后仍然较差，5年生存率仅在20%-30%左右。因此，深入探究骨肉瘤的发病机制，寻找更有效的治疗靶点和治疗方法，对于提高骨肉瘤患者的生存率和生活质量具有至关重要的意义。

MG63细胞作为一种常用的骨肉瘤细胞系，具有成骨细胞表型特征，在骨肉瘤的研究中被广泛应用。构建基于微球的3D体外培养体系来研究骨肉瘤MG63细胞具有独特的优势。微球作为一种三维载体，具有高比表面积、良好的生物相容性和可降解性等特点，能够为MG63细胞提供一个三维的生长环境，使其在微球表面或内部附着、生长和增殖，更真实地模拟骨肉瘤细胞在体内的生长状态。通过这种培养体系，可以更深入地研究骨肉瘤MG63细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡等生物学行为，以及肿瘤细胞与微环境之间的相互作用，有助于揭示骨肉瘤的发病机制和转移机制。同时，基于微球的3D体外培养体系还可以作为药物筛选和评估的平台，为开发新型的抗骨肉瘤药物提供更有效的实验模型，为骨肉瘤的临床治疗提供理论支持和新的治疗策略，具有重要的理论意义和临床应用价值。

1.2国内外研究现状

三维（3D）体外培养体系的研究在国内外均取得了显著进展，已成为生物医学领域的研究热点之一。在国外，早在20世纪末，科研人员就开始探索3D培养技术。随着材料科学、细胞生物学和工程学等多学科的交叉融合，3D培养体系不断发展创新，多种新型的3D培养技术和材料应运而生。例如，基于水凝胶的3D培养技术，水凝胶具有良好的生物相容性和可调控的物理化学性质，能够为细胞提供一个类似于体内细胞外基质的三维环境，支持细胞的生长、增殖和分化。美国的一些研究团队利用水凝胶成功培养出多种类型的细胞，包括神经细胞、心肌细胞和肿瘤细胞等，并对细胞在水凝胶中的生物学行为进行了深入研究。此外，生物打印技术作为一种新兴的3D培养手段，能够精确地构建具有复杂三维结构的细胞组织模型，为组织工程和再生医学的研究提供了有力工具。欧洲的科研人员通过生物打印技术制造出具有血管化结构的组织工程支架，在体外成功培养了功能性的组织和器官，为未来的器官移植和修复提供了新的思路。

在国内，3D体外培养体系的研究也受到了广泛关注，众多科研机构和高校纷纷开展相关研究工作。近年来，我国在3D培养技术和应用方面取得了一系列重要成果。例如，中国科学院的研究团队开发了一种新型的3D细胞培养微载体，该微载体具有独特的结构和表面性质，能够高效地负载细胞并促进细胞的三维生长