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白酒窖泥中微生物多样性及其代谢产物研究

目录

文档综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1.1白酒产业概况与窖泥功能．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1.2窖泥微生物生态研究的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

1.2国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.2.1窖泥微生物群落结构研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

1.2.2窖泥功能微生物代谢活动探讨．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

1.2.3现有研究不足与本文切入点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

1.3研究目标与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

1.3.1主要研究目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

1.3.2具体研究任务．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

1.4技术路线与研究方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

1.4.1总体研究思路．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

1.4.2关键技术手段．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

2.1试验材料与样品采集．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

2.1.1试验窖泥来源与基本信息．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

2.1.2样品采集方法与环境条件记录．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

2.1.3样品预处理与保存．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

2.2实验室微生物培养技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

2.2.1培养基制备与选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

2.2.2微生物分离纯化方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

2.2.3纯菌株保藏．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

2.3微生物多样性分析技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

2.3.1基因组DNA提取与质量检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

2.3.216SrRNA基因测序策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

2.3.3物种注释与群落结构分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

2.3.4多样性指数计算与比较．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

2.4代谢产物检测与鉴定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

2.4.1提取样品中的次级代谢物．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

2.4.2代谢产物化学分析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

2.4.3产物数据库比对与结构鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47

2.5数据分析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49

2.5.1统计软件选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50

2.5.2多样性与代谢数据统计分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52

结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53

3.1窖泥样品微生物群落结构特征．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．55

3.1.1门水平微生物群落组成分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．56

3.1.2属水平优势