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G试验培训课件

课程介绍与培训目标本课程旨在帮助学员：1系统掌握G试验全流程从样本采集、前处理到上机检测、结果分析的完整操作技能，确保能够独立完成标准化的检测过程。2结合国内外案例解析操作细节通过典型案例学习，深入理解不同临床情境下G试验的应用特点和结果解读要点。3培养独立分析和解读检测结果能力提升对复杂临床情况下G试验结果的判断能力，特别是对假阳性、假阴性及疑难结果的分析能力。

G试验在临床实验室的意义侵袭性真菌感染诊断的核心方法G试验是目前临床上公认的侵袭性真菌感染早期诊断的重要非培养方法之一，特别是在培养阴性但临床高度怀疑真菌感染的患者中，其诊断价值更为显著。在EORTC/MSG诊断标准中，G试验已被列为侵袭性真菌感染的微生物学证据之一。提高真菌血症早期检出率相比传统培养方法需要3-7天出结果，G试验可在2-4小时内完成检测，大大缩短了诊断时间。研究表明，G试验可提前2-7天发现侵袭性真菌感染，使患者能够及早接受抗真菌治疗，显著改善预后，降低病死率。作为抗真菌药物疗效评估指标G试验不仅用于初始诊断，还可作为抗真菌治疗效果的动态监测指标。在有效治疗后，患者血清中的1,3-β-D葡聚糖水平通常会逐渐下降，为临床医师调整治疗方案提供参考依据，有助于判断治疗的有效性和持续时间。

G试验原理概述检测原理G试验（又称葡聚糖试验）是一种基于鲎试剂凝固途径的生化检测方法，其核心原理是检测血浆中1,3-β-D葡聚糖（BG）的含量。当血液样本中的BG与鲎变形细胞裂解物中的G因子接触后，会激活凝固级联反应，最终形成凝胶，通过测量凝胶形成的速度或浊度变化来间接定量BG的含量。BG的来源与意义1,3-β-D葡聚糖是大多数侵袭性真菌（包括念珠菌、曲霉菌、隐球菌等）细胞壁的主要成分之一，约占细胞壁干重的30-60%。在真菌感染过程中，随着真菌在体内繁殖和代谢，BG会持续释放到血液循环中。健康人体内BG含量极低，当检测到血液中BG水平显著升高时，通常提示存在侵袭性真菌感染。检测机制人体吞噬细胞在吞噬真菌后，会持续释放BG到血液中，使血液中BG浓度升高。即使在血培养阴性的情况下，G试验仍可检测到血液中BG的存在，为早期诊断提供了可能。此外，研究表明BG在血液中的半衰期较长（约20小时），有利于检测窗口期的延长。

BG与常见真菌种类对应关系念珠菌属白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌等均能产生高水平BG。念珠菌感染时，血清BG水平通常可达80-120pg/mL以上，对念珠菌血症的敏感性可达85-95%。曲霉菌属烟曲霉、黄曲霉等产生中等水平BG。侵袭性曲霉菌病患者BG水平通常在60-100pg/mL范围，敏感性约为70-85%，早期诊断价值略低于GM试验。其他常见真菌镰刀菌、毛霉、新型隐球菌等均可产生不同水平的BG。其中毛霉和犀牛毛孢子菌属细胞壁中BG含量较低，G试验检出率较低，常出现假阴性。非真菌性BG干扰来源某些抗生素（如头孢菌素类、青霉素类）含有BG成分，可引起假阳性含纤维素的纱布、棉签等医用耗材污染采血过程血液制品输注（特别是白蛋白、免疫球蛋白等）细菌感染（如铜绿假单胞菌、大肠埃希菌等）血液透析（使用纤维素膜）真菌定植与病原性感染的BG表现对比

试剂与仪器介绍市场主流G试验试剂盒类型试剂盒名称生产厂家检测方法临界值Fungitell?AssociatesofCapeCod(美国)动力学比色法≥80pg/mL真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测试剂盒振德医疗（中国）比浊法≥10pg/mLWAKOβ-葡聚糖测定试剂盒和光纯药（日本）比色法≥11pg/mLDynamiker?真菌1,3-β-D葡聚糖检测试剂盒天隆科技（中国）比浊法≥70pg/mLBioMérieuxβ-葡聚糖检测套装生物梅里埃（法国）比色法≥80pg/mL检测方法对比比浊法通过测量混合反应后溶液浊度的变化来定量BG含量。优点是操作简便，检测时间短（约30-60分钟）；缺点是灵敏度稍低，受样本本底浊度影响较大。比色法通过测量显色反应的强度来间接反映BG的含量。优点是灵敏度高，检测下限可达1pg/mL，不受样本浊度影响；缺点是操作复杂，检测时间长（约2-3小时）。推荐配套检测设备清单专用动态比浊分析仪（如MT-6500、MT-10、BG16等）全自动酶标仪（比色法专用）恒温孵育器（37°C±0.5°C）微量离心机（≥10,000rpm）可调式微量移液器（20-200μL、100-1000μL）

样本采集与前处理规范血浆为首选样本类型G试验检测的标准样本为血浆，不推荐使用血清。这是因为在血清制备过程中，血液凝固反应可能会激活或消耗部分BG，影响最终检测结果的准确性。采血管种类选择推荐使用肝素钠抗凝采血管（绿色盖），不推荐使用EDTA抗凝管（紫色盖）或枸橼酸钠抗凝管（蓝色