《基于血小板活化生物标志物CD62p检测的中药注射剂活血化瘀活性评价方法操作规程》.docxVIP

ICS11.120.01

CCSC27

团体标准

T/TPPA0007-2024

基于血小板活化生物标志物CD62p检测的

中药注射剂活血化瘀活性评价方法操作

规程

OperatingprocedureforevaluatingthepotentoftraditionalChinesemedicineinjectionforpromotingbloodcirculationandremovingblood

stasisbasedonactivatedplateletbiomarkertest

2024-05-31发布2024-05-31实施

天津市医药行业协会发布

T/TPPA0007-2024

目次

前言 I

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4检测原理 1

5材料与设备 2

5.1材料 2

5.2设备 2

6实验方法 2

6.1溶液配制 2

6.2实验步骤 2

7数据处理及判定 4

I

T/TPPA0007-2024

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本文件由天津市药品检验研究院提出。

本文件由天津市医药行业协会归口。

本文件起草单位：天津市药品检验研究院、天津天士力之骄药业有限公司、现代中药创制全国重点实验室、天津药物研究院有限公司、天津红口药业股份有限公司、津药达仁堂集团有限公司中药研究院、天津宏仁堂药业有限公司、津药达仁堂集团股份有限公司乐仁堂制药厂。

本文件主要起草人：王冲、税凤春、徐琳、岳洪水、张铁军、田成旺、周学海、宋纹、张培元、华晓东、杨天骄、贾文婷、刘萍、许浚、延阔、侯钰卓、张营、张慧、刘丽、聂晓洁、张俊华、何毅。

T/TPPA0007-2024

基于血小板活化生物标志物CD62p

检测的中药注射剂活血化瘀活性评价方法操作规程

1范围

本文件规定了以体外血小板活化生物标志物P-选择素(CD62p)评价中药注射剂活血化瘀活性的实验方法。

本文件适用于以活化血小板为靶点的活血化瘀类中药注射剂的活性评价，对于作用于其他靶点如改善血液流变学等的活血化瘀类中药注射剂不适用。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB14925实验动物环境及设施

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T24001环境管理体系要求及使用指南

GB/T45001职业健康安全管理体系要求及使用指南

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

生物标志物biomarker

又称生物学标记或生物标志，指反映生物体系与外源化学物、物理和生物因素之间相互作用的任何可测定的指标，包括化学、生化、生理、行为或其他的改变。

3.2

流式细胞术flowcytometry

系以流式细胞仪为工具，通过多种单克隆的抗体以及荧光染料，测定一个细胞的一种或多种参数，用于判断细胞的属性和分化程度。

4检测原理

2

T/TPPA0007-2024

对血小板功能的影响是活血化瘀类中药临床功效的主要评价指标之一，《实用流式细胞术一血液病篇》及大量临床研究实践表明，血小板膜糖蛋白P-选择素(CD62p)是临床上判定血小板活化程度及血栓形成的特异性生物标志物，因此用CD62p作为生物标志物可以准确可靠的评价活血化瘀类中药注射剂的活血化瘀作用。血小板活化后，CD62p表达上调，程度与血小板活化有很强的相关性。二磷酸腺苷(ADP)为一种较为温和的血小板活化诱导剂，可适度活化血小板，引发后续血小板凝集、血瘀等反应。具有活血化瘀功能的药物应能拮抗ADP作用，下调血小板CD62p表达，发挥活血化瘀作用。

本法系将一定量的供试品与大鼠抗凝血混合，作用一定时间后，以流式细胞术检测生物标志物的方法测定经ADP激活的血小板活化率，并与供试品作用前进行比较，判定该供试品是否具有活血化瘀作用。

5材料与设备

5.1材料

5.1.1