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制作洋葱表皮细胞实验指导书

一、实验目的

本实验旨在通过制作洋葱鳞片叶内表皮细胞的临时装片，并利用光学显微镜进行观察，使操作者能够清晰识别植物细胞的基本形态结构，如细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核以及液泡等。同时，掌握临时装片的制作技巧和显微镜的规范操作方法，加深对细胞作为生物体基本结构与功能单位的理解。

二、实验原理

植物细胞具有相对稳定的形态结构。洋葱鳞片叶内表皮细胞较为薄而透明，易于撕取和观察，是观察植物细胞基本结构的理想材料。通过将洋葱表皮细胞置于载玻片上的清水中，使其保持正常的形态，再经碘液染色，可以更清晰地显示细胞核等结构。利用光学显微镜的放大作用，我们便能观察到细胞的微观世界。

三、实验材料与用具

（一）实验材料新鲜洋葱鳞片叶若干。

（二）实验用具光学显微镜一台，载玻片若干块，盖玻片若干张，解剖针一枚,镊子一把,刀片一片,吸水纸适量,滴管一支或洗瓶一个,干净的纱布或擦镜纸。

（三)实验试剂

清水以及稀碘液。

四·实验步骤详解

(一)准备工作

实验开始前，需将双手洗净，以避免污染实验材料。取一片洁净的载玻片和盖玻片，用纱布或擦镜纸轻轻擦拭干净。擦拭盖玻片时动作应格外轻柔，防止用力过猛造成碎裂。

(二)制作临时装片

1.滴水：用滴管在载玻片的中央位置滴上一滴清水。水量要适中，过多易溢出，过少则可能导致细胞干涸。

2.取材：取洋葱一个，剥取一片新鲜的鳞片叶。用刀片在鳞片叶内侧（即较凹的一面）划一个约指甲盖大小的方形或圆形切口，注意不要划透整个叶片。然后用镊子夹住切口边缘，轻轻撕取一小块透明的薄膜状内表皮。这一步的关键在于撕取的表皮要尽可能薄且完整，没有叶绿素干扰观察效果更佳。

3.展平：将撕取下来的洋葱内表皮小心地放入载玻片中央的水滴中，并用解剖针或镊子的钝端轻轻将其展平，确保表皮细胞之间没有重叠，否则会影响观察清晰度。

4.盖片：用镊子夹起盖玻片，使盖玻片的一侧先接触载玻片上的水滴边缘，然后缓缓放下，将另一侧轻轻覆盖在表皮上。这样做的目的是为了避免产生气泡，若操作不慎出现少量小气泡，可在盖玻片一侧滴加少许清水，并用吸水纸在另一侧吸引，尝试将气泡驱出。

(三)染色

为了更清晰地观察到细胞核等结构，通常需要进行染色。在盖玻片的一侧滴加一滴稀碘液，然后用吸水纸在盖玻片的另一侧吸引，使碘液能够均匀地渗透到盖玻片下方，将细胞染色。染色时间不宜过长，以免影响细胞的正常形态。

(四)显微镜观察

1.对光：将制作好的临时装片放在显微镜的载物台上，用压片夹固定好。转动转换器，使低倍物镜对准通光孔。然后调节遮光器，选择一个较大的光圈，并转动反光镜，直至在目镜中看到一个明亮、均匀的圆形视野。

2.调焦与观察：从侧面注视物镜，缓慢转动粗准焦螺旋，使镜筒下降，直至物镜接近玻片标本（注意不要碰到玻片）。然后左眼注视目镜，同时反向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直至视野中出现模糊的物像。此时，再略微转动细准焦螺旋，使物像更加清晰。仔细观察视野中的洋葱表皮细胞，识别其各种结构。若想观察不同位置的细胞或更大放大倍数下的结构，可以轻微移动装片或转换高倍物镜（转换高倍镜后一般只需调节细准焦螺旋）。

五、注意事项

1.实验过程中要注意安全，使用刀片时需小心，避免割伤手指。

2.洋葱鳞片叶内表皮的撕取是实验成功的关键之一，应耐心操作，力求获得单层、透明且无破损的表皮。

3.盖盖玻片时务必缓慢、轻柔，以防止产生过多气泡，影响观察。若气泡较多，建议重新制作装片。

4.染色时碘液的用量要适当，过多可能会污染显微镜的镜头。

5.使用显微镜时，要严格按照操作规程进行，特别是在下降镜筒时，眼睛一定要从侧面注视物镜，防止物镜压碎玻片标本或损坏镜头。

6.实验结束后，应及时清理实验台，将用过的载玻片、盖玻片等放入指定容器，显微镜需清洁后按规定要求存放。

六、实验结果与讨论

在低倍镜下，可以观察到洋葱表皮细胞呈排列整齐的长多角形或近似长方形，彼此紧密相连。细胞壁是最外层较厚的结构，具有支持和保护作用。细胞壁内侧是细胞膜，但由于细胞膜极薄且紧贴细胞壁，在光学显微镜下不易与细胞壁区分开。细胞中央较大的透明区域是液泡，成熟的植物细胞液泡占据了细胞的大部分体积。被碘液染成深色的结构是细胞核，位于细胞质中。细胞质是细胞膜以内、细胞核以外的半透明胶状物质。

讨论：为什么在观察植物细胞时通常选择洋葱鳞片叶内表皮作为材料？这与它的结构特点有何关系？如果在制作装片时发现细胞有重叠现象，可能的原因是什么，应如何改进操作？

七、实验后处理

实验完毕，将显微镜擦拭干净，物镜转离通光孔，镜筒降至最低处，放入镜箱。用过的吸水纸、洋葱残渣等放入垃圾桶，载玻片和盖玻片按老师要求进行清洗或回收处理。整理好实验桌面，确保干净整洁。

通过本次实验，不仅能够直观地认识植物细胞的基本形