湖南省pcr上岗证考试题及答案.docVIP

湖南省pcr上岗证考试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应的基本步骤不包括（）

A.变性B.复性C.延伸D.转录

答案：D

2.Taq酶的最适反应温度是（）

A.55℃B.72℃C.94℃D.4℃

答案：B

3.PCR引物设计时，其长度一般为（）

A.10-15bpB.15-30bpC.30-50bpD.50-100bp

答案：B

4.以下哪种物质不是PCR反应体系的成分（）

A.dNTPB.模板DNAC.限制性内切酶D.引物

答案：C

5.PCR技术的发明人是（）

A.克里克B.沃森C.穆利斯D.桑格

答案：C

6.进行PCR实验时，防止污染的关键环节不包括（）

A.实验环境清洁B.试剂质量C.样本采集量D.移液器使用

答案：C

7.一个完整的PCR反应循环中，变性时间一般为（）

A.1-5秒B.30-60秒C.2-3分钟D.5-10分钟

答案：B

8.以下哪种碱基配对方式是错误的（）

A.A-TB.G-CC.A-GD.T-A

答案：C

9.用于PCR反应的模板DNA可以是（）

A.基因组DNAB.mRNAC.tRNAD.rRNA

答案：A

10.PCR反应体系中Mg2+的主要作用是（）

A.调节pH值B.激活Taq酶C.稳定模板D.溶解引物

答案：B

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的应用领域包括（）

A.疾病诊断B.法医鉴定C.基因克隆D.物种进化研究

答案：ABCD

2.影响PCR反应的因素有（）

A.引物浓度B.模板浓度C.循环次数D.反应温度

答案：ABCD

3.以下属于PCR反应所需的试剂有（）

A.Taq酶B.dNTP混合物C.引物D.缓冲液

答案：ABCD

4.设计PCR引物时需要考虑的因素有（）

A.引物的长度B.引物的GC含量C.引物的Tm值D.引物自身及引物之间的互补性

答案：ABCD

5.PCR实验中防止污染的措施有（）

A.分区操作B.戴手套、口罩C.定期清洁仪器D.使用一次性耗材

答案：ABCD

6.以下哪些情况可能导致PCR扩增失败（）

A.引物设计不合理B.模板DNA降解C.Taq酶失活D.反应体系中存在抑制剂

答案：ABCD

7.PCR产物的检测方法有（）

A.琼脂糖凝胶电泳B.聚丙烯酰胺凝胶电泳C.测序D.荧光定量检测

答案：ABCD

8.关于Taq酶的特点，正确的是（）

A.耐高温B.具有5→3聚合酶活性C.具有3→5外切酶活性D.无校对功能

答案：ABD

9.在PCR反应中，循环参数包括（）

A.变性温度B.复性温度C.延伸温度D.循环次数

答案：ABCD

10.以下哪些是常用的PCR仪品牌（）

A.伯乐B.赛默飞C.罗氏D.安捷伦

答案：ABCD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应可以无限扩增目标DNA片段。（）

答案：×

2.引物的GC含量越高，其Tm值越低。（）

答案：×

3.在PCR实验中，模板DNA的纯度对扩增结果没有影响。（）

答案：×

4.Taq酶在94℃时会失活。（）

答案：×

5.增加PCR反应的循环次数一定能提高扩增产物的产量。（）

答案：×

6.设计引物时，引物的3端可以出现互补配对。（）

答案：×

7.荧光定量PCR可以对核酸进行绝对定量和相对定量。（）

答案：√

8.PCR反应体系中不需要添加缓冲液。（）

答案：×

9.只要引物能与模板结合，就一定能成功扩增出目标片段。（）

答案：×

10.进行PCR实验时，实验环境不需要进行清洁消毒。（）

答案：×

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR反应的基本原理。

答案：PCR基于DNA半保留复制原理。在高温下模板DNA变性解链，低温时引物与模板互补配对复性，中温下Taq酶以dNTP为原料沿模板链延伸合成新DNA链，经多