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天津市pcr上岗证考试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的中文名称是（）

A.聚合酶链反应B.核酸内切酶反应C.连接酶反应

答案：A

2.PCR反应中，哪种物质提供了合成新链的模板（）

A.dNTPB.引物C.模板DNA

答案：C

3.以下哪种酶是PCR反应所必需的（）

A.逆转录酶B.Taq酶C.限制酶

答案：B

4.PCR反应的变性温度一般为（）

A.90-95℃B.50-60℃C.70-75℃

答案：A

5.在PCR反应中，引物的作用是（）

A.提供起始合成的3-OH末端B.提供起始合成的5-OH末端C.与模板结合进行修复

答案：A

6.PCR产物的特异性主要取决于（）

A.引物的特异性B.Taq酶的活性C.dNTP的浓度

答案：A

7.以下哪种物质不是PCR反应体系的成分（）

A.Mg2+B.乙醇C.缓冲液

答案：B

8.如果PCR扩增没有得到预期产物，可能的原因不包括（）

A.引物设计错误B.模板量过多C.退火温度过高

答案：B

9.实时荧光定量PCR主要用于（）

A.基因表达定量分析B.基因克隆C.基因测序

答案：A

10.PCR反应中，退火过程是（）

A.引物与模板结合B.模板变性C.新链延伸

答案：A

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应体系包括以下哪些成分（）

A.模板DNAB.引物C.Taq酶D.dNTPE.缓冲液

答案：ABCDE

2.影响PCR扩增效率的因素有（）

A.引物长度B.退火温度C.模板纯度D.Taq酶活性E.dNTP浓度

答案：ABCDE

3.以下哪些情况可能导致PCR出现假阳性结果（）

A.引物二聚体形成B.实验室污染C.气溶胶污染D.交叉污染E.样本中存在抑制物

答案：BCD

4.实时荧光定量PCR中，常用的荧光染料有（）

A.SYBRGreenIB.溴化乙锭C.TaqMan探针D.荧光素E.罗丹明

答案：AC

5.在PCR引物设计时，需要考虑的因素有（）

A.引物长度B.引物特异性C.引物的GC含量D.引物的二级结构E.引物与模板的互补性

答案：ABCDE

6.PCR技术在以下哪些领域有应用（）

A.医学诊断B.法医学鉴定C.基因工程D.疾病研究E.食品检测

答案：ABCDE

7.以下关于Taq酶的说法正确的是（）

A.具有热稳定性B.是一种DNA聚合酶C.催化dNTP合成DNAD.最佳作用温度为72℃左右E.来源于嗜热微生物

答案：ABCDE

8.为避免PCR污染，可以采取的措施有（）

A.严格分区操作B.使用一次性耗材C.定期清洁实验室D.实验后紫外线照射E.合理设计引物

答案：ABCD

9.PCR产物的分析方法有（）

A.琼脂糖凝胶电泳B.聚丙烯酰胺凝胶电泳C.测序D.酶切分析E.杂交分析

答案：ABCDE

10.以下哪些是PCR技术的特点（）

A.特异性强B.灵敏度高C.简便快捷D.可定量分析E.对模板要求低

答案：ABCDE

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应中，dNTP可以随机合成新的DNA链。（）

答案：错误

2.引物越长，PCR特异性越好。（）

答案：错误

3.Taq酶在PCR反应中可以反复使用。（）

答案：正确

4.只要有模板DNA，PCR就能成功扩增。（）

答案：错误

5.实时荧光定量PCR只能检测DNA。（）

答案：错误

6.引物二聚体的形成会影响PCR扩增效率。（）

答案：正确

7.PCR反应不需要缓冲液来维持合适的pH值。（）

答案：错误

8.所有的DNA聚合酶都可以用于PCR反应。（）

答案：错误

9.琼脂糖凝胶电泳只能检测PCR产物的大小，不能判断其纯度。（）

答案：错误

10.提高退火温度一定能提高PCR特异性。（）

答案：错误

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR的基本原理。

答案：PCR是一种体外扩增DNA的技术。以DNA为模板，在Taq酶的作用下，以四种dNTP为原料，利用引物与模板特异性结合，经过变性（使模板DNA双链解开）、退火（引物与模板结合）、延伸（合成新的DNA链）三个步骤