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湖北省pcr上岗证考试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.PCR技术的中文全称是（）

A.聚合酶链式反应B.多聚酶链反应C.聚合酶链反应D.以上都不对

答案：A

2.以下哪种酶是PCR反应中必需的（）

A.限制性内切酶B.TaqDNA聚合酶C.逆转录酶D.DNA连接酶

答案：B

3.PCR反应的基本步骤不包括（）

A.变性B.复性C.延伸D.转录

答案：D

4.PCR反应体系中，dNTP的作用是（）

A.提供能量B.作为模板C.合成新的DNA链D.调节反应pH

答案：C

5.引物的长度一般为（）

A.5-10bpB.10-15bpC.15-30bpD.30-50bp

答案：C

6.以下关于PCR引物设计原则，错误的是（）

A.引物长度适宜B.避免引物自身互补C.引物GC含量越高越好D.上下游引物Tm值相近

答案：C

7.PCR反应中，模板DNA的量一般为（）

A.1-10ngB.10-100ngC.100-1000ngD.1μg以上

答案：B

8.进行PCR实验时，所用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是（）

A.反复洗涤B.用酒精消毒C.高压灭菌D.在-20℃保存

答案：C

9.荧光定量PCR技术中，用于检测荧光信号的仪器部件是（）

A.光源B.探测器C.热循环模块D.进样系统

答案：B

10.以下哪种情况可能导致PCR结果出现非特异性扩增（）

A.引物特异性强B.退火温度过高C.模板量过低D.引物浓度过高

答案：D

二、多项选择题（每题2分，共20分）

1.PCR技术可应用于（）

A.基因诊断B.基因克隆C.法医鉴定D.疾病监测

答案：ABCD

2.以下属于PCR反应体系成分的有（）

A.模板DNAB.引物C.dNTPD.TaqDNA聚合酶

答案：ABCD

3.设计PCR引物时需要考虑的因素有（）

A.引物的长度B.引物的GC含量C.引物的Tm值D.引物的特异性

答案：ABCD

4.PCR反应中影响扩增效率的因素包括（）

A.模板质量B.引物浓度C.酶活性D.反应温度和时间

答案：ABCD

5.荧光定量PCR的优点有（）

A.灵敏度高B.特异性强C.能进行定量分析D.操作简单快速

答案：ABC

6.以下哪些情况可能造成PCR扩增失败（）

A.模板降解B.引物设计错误C.反应体系污染D.退火温度不合适

答案：ABCD

7.PCR实验室分区一般包括（）

A.试剂准备区B.标本制备区C.扩增区D.产物分析区

答案：ABCD

8.在PCR实验中，防止交叉污染的措施有（）

A.严格分区操作B.定期清洁消毒仪器设备C.使用一次性耗材D.规范实验人员操作

答案：ABCD

9.实时荧光定量PCR常用的荧光化学物质有（）

A.SYBRGreenIB.荧光素C.TaqMan探针D.罗丹明

答案：AC

10.PCR技术在微生物检测中的应用包括（）

A.细菌鉴定B.病毒检测C.真菌分型D.微生物耐药性检测

答案：ABCD

三、判断题（每题2分，共20分）

1.PCR技术只能扩增已知序列的DNA片段。（）

答案：×

2.TaqDNA聚合酶具有3→5外切酶活性。（）

答案：×

3.引物的Tm值越高，PCR反应的退火温度就可以设置得越高。（）

答案：√

4.PCR反应中，模板DNA的纯度对扩增结果没有影响。（）

答案：×

5.荧光定量PCR可以对起始模板进行绝对定量和相对定量。（）

答案：√

6.为了提高PCR扩增效率，引物浓度越高越好。（）

答案：×

7.PCR实验室可以不进行分区。（）

答案：×

8.在PCR反应中，延伸时间主要取决于模板DNA的长度。（）

答案：√

9.只要引物设计正确，PCR反应就一定能得到理想的扩增结果。（）

答案：×

10.进行PCR实验时，操作人员不需要进行防护。（）

答案：×

四、简答题（每题