核黄素磷酸钠质量检查与含量测定方法.pdfVIP

核黄素磷酸钠质量检查与含量测定方法.pdf

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核黄素磷酸钠

HehuangsuLinsuanna

RiboflavinSodiumPhosphate

书页号:2005年版二部-601

[修订]

【检查】游离磷酸精密称取本品0.20g(按干燥品计算),置100ml量瓶中,加水

30ml振摇使溶解,作为供试品溶液;另取磷酸盐对照溶液[精密称取经105℃干燥2小时

的磷酸二氢钾0.42g,置1000ml量瓶中,加硫酸溶液(3→10)10ml与水适量使溶解,并稀

释至刻度,摇匀,临用时再稀释5倍]20ml,置另一100ml量瓶中,加水10ml,摇匀,作

为对照溶液。向上述两种溶液中加钼酸铵硫酸试液2.5ml与1-氨基-2-萘酚-4-磺酸溶液(取

无水亚硫酸钠5g,亚硫酸氢钠94.3g与1-氨基-2-萘酚-4-磺酸0.7g,充分混合,临用时取此

混合物1.5g,加水10ml使溶解,必要时滤过)1ml,摇匀,用水稀释至刻度,摇匀,在20℃

放置30分钟,照紫外-可见分光光度法(附录ⅣA),在740nm的波长处测定吸光度,供试

品溶液的吸光度大于对照溶液的吸光度。

【含量测定】照高效液相色谱法(附录VD)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇—0.054mol/L

磷酸二氢钾溶液(15:85)为流动相,检测波长为267nm。取核黄素磷酸钠对照品10mg,置

50ml量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为系统适用性试验溶液。量取20μl注

入液相色谱仪,调节流速,使核黄素磷酸钠峰的保留时间约为40分钟,各色谱峰出峰顺序

如下,核黄素磷酸钠峰与4’-核黄素磷酸钠峰的分离度应大于2.0。

成分相对保留时间

3’,4’-核黄素二磷酸酯0.2

3’,5’-核黄素二磷酸酯0.3

4’,5’-核黄素二磷酸酯0.5

3’-核黄素磷酸钠0.7

4’-核黄素磷酸钠0.9

核黄素磷酸钠1

核黄素2

测定法避光操作。取本品10mg,精密称定,置50ml量瓶中,加流动相适量,振摇

使溶解,用流动相稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;另精密称取核黄素对照品10mg,

置50ml量瓶中,加盐酸1ml使溶解,用流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。精密

量取供试品溶液和对照品溶液各20μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰

面积计算,即得。计算如下:

ΣAt×Ws

×100%

As×Wt×(1−d)

式中∑At为供试品溶液色谱图中核黄素磷酸钠峰、3’-核黄素磷酸钠峰、4’-核黄素磷酸

钠峰及游离核黄素峰的峰面积之和;

Riboflavinsodiumphosphate

HehuangsuLinsuanna

RiboflavinSodiumPhosphate

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