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临床基因扩增试题及答案
一、单项选择题
1.临床基因扩增检验技术主要检测的是
A.蛋白质
B.糖类
C.核酸
D.脂类
答案:C
2.实时荧光定量PCR技术中,荧光信号积累到可以被检测到的最低水平时的循环数被称为
A.Ct值
B.Tm值
C.OD值
D.R值
答案:A
3.基因扩增检验实验室中,进行标本处理的区域是
A.试剂准备区
B.标本制备区
C.扩增区
D.产物分析区
答案:B
4.Taq酶的特点是
A.具有5-3聚合酶活性和3-5外切酶活性
B.具有5-3聚合酶活性和5-3外切酶活性
C.具有3-5聚合酶活性和5-3外切酶活性
D.只具有5-3聚合酶活性
答案:B
5.引物设计时,其长度一般为
A.10-15bp
B.15-30bp
C.30-50bp
D.50-100bp
答案:B
6.下列哪种物质不是PCR反应体系的成分
A.dNTP
B.引物
C.Taq酶
D.限制性内切酶
答案:D
7.临床基因扩增检验中,防止污染最关键的环节是
A.实验设备的清洁
B.实验人员的操作规范
C.实验环境的消毒
D.试剂的质量
答案:B
8.巢式PCR与普通PCR的区别在于
A.引物设计不同
B.反应温度不同
C.模板不同
D.循环次数不同
答案:A
9.基因扩增产物的分析方法不包括
A.凝胶电泳
B.荧光定量分析
C.免疫比浊
D.测序
答案:C
10.在临床基因扩增实验室中,用于检测扩增产物是否存在的仪器是
A.离心机
B.移液器
C.荧光定量PCR仪
D.酸度计
答案:C
二、多项选择题
1.临床基因扩增检验技术可应用于以下哪些方面
A.病原体检测
B.肿瘤诊断
C.遗传病诊断
D.器官移植配型
答案:ABCD
2.PCR反应体系包含的成分有
A.模板DNA
B.引物
C.dNTP
D.Taq酶
答案:ABCD
3.引物设计的基本原则包括
A.引物长度合适
B.避免引物自身互补
C.引物GC含量合理
D.引物3端避免错配
答案:ABCD
4.临床基因扩增实验室分区包括
A.试剂准备区
B.标本制备区
C.扩增区
D.产物分析区
答案:ABCD
5.实时荧光定量PCR技术的优点有
A.定量准确
B.灵敏度高
C.能有效避免污染
D.可同时检测多个样本
答案:ABCD
6.基因扩增检验中可能出现的污染类型有
A.标本间交叉污染
B.实验室环境污染
C.试剂污染
D.仪器设备污染
答案:ABCD
7.巢式PCR的优点包括
A.提高灵敏度
B.提高特异性
C.降低假阳性
D.可扩增较长片段
答案:ABC
8.用于基因扩增产物分析的技术有
A.凝胶成像分析
B.荧光定量分析
C.核酸测序
D.蛋白质印迹
答案:ABC
9.临床基因扩增检验中,对实验人员的要求有
A.经过专业培训
B.严格遵守操作规程
C.定期进行健康检查
D.具备良好的生物安全意识
答案:ABCD
10.临床基因扩增实验室质量控制包括
A.室内质量控制
B.室间质量评价
C.仪器设备校准
D.试剂验收
答案:ABCD
三、判断题
1.临床基因扩增检验技术只能用于检测DNA。(×)
2.PCR反应中,退火温度越高,引物与模板的结合越稳定。(×)
3.基因扩增实验室中,不同区域的工作服可以混穿。(×)
4.实时荧光定量PCR技术可以对基因表达进行绝对定量。(√)
5.引物的Tm值越高,其在PCR反应中的退火温度就可以设置得越高。(√)
6.临床基因扩增检验中,只要实验结果阳性就一定意味着患者感染了相应病原体。(×)
7.巢式PCR由于进行了两轮扩增,所以其灵敏度和特异性都低于普通PCR。(×)
8.凝胶电泳可以根据DNA片段的大小对扩增产物进行分离和分析。(√)
9.临床基因扩增实验室的仪器设备不需要定期维护。(×)
10.实验人员在进入基因扩增实验室不同区域时不需要更换鞋套。(×)
四、简答题
1.简述PCR技术的基本原理。
PCR技术是以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板5末端和3末端相互补的寡核苷酸片段为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成。经过多次循环,使目的DNA片段得到大量扩增。其基本过程包括变性、退火和延伸三个步骤,不断重复这三个步骤,从而实现DNA的指数式扩增。
2.简述临床基因扩增实验室防止污染的措施。
首先是实验室分区合理,不同区域独立且有缓冲间,防止交叉污染。实验用品如移液器、耗材等专用,定期清洁消毒。实验人员严格遵守操作规程,进入不同区域更换工作服、鞋套等。试
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