6、技术路线图(肿瘤干细胞).pptxVIP

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mid基因芯片筛选疾病表达差异显著的miRNA基因芯片筛选疾病表达差异显著的基因生物信息学网站检测miR-A与mIR-B;miR-A与geneC以及mIR-B与geneC的靶向关系临床组织样本收集qRT-PCR检测各组织相关miRNA和基因;CSC细胞分选后通过westernblot检测CSC标志物、免疫组化检测geneC及下游因子表达统计学分析各分子表达与XX癌发展及患者生存的相关性、各分子表达水平之间的相关性、各分子表达与CSC标志物的相关性Co-IP验证miR-A与miR-B的结合双荧光素酶验证miRNA/B与geneC结合分别过表达/敲除miR-A与mIR-B,检测geneC的表达同时过表达/敲低miR-A与mIR-B,检测geneC的表达通路验证生信筛选临床水平细胞水平动物水平qRT-PCRwesternblot活体荧光成像SFAHE染色体内验证裸鼠成瘤实验细胞株培养、筛选和CSC细胞分选(FACS)表达集落形成能力增殖细胞周期自我更新能力westernblot检测各组织相关基因转录物和CSC标志物表达水平软琼脂克隆形成实验EDU流式细胞术miR-Amimic+miR-BmimicmiR-Amimic+miR-Bmimic+Si-geneCmiR-Ainhibitor+miR-BinhibitorSi-geneCControlNorthernblot检测各组织相关mRNASFAmiR-A/B与geneC在XX癌CSCs中的功能研究分组转染制悬液miR-A、miR-B、geneC与XX癌的生物学相关性

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