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河北省pcr考试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应中，延伸温度一般是（）

A.55℃B.72℃C.94℃D.4℃

2.以下哪种酶是PCR反应中常用的聚合酶（）

A.DNA连接酶B.逆转录酶C.TaqDNA聚合酶D.限制性内切酶

3.PCR反应体系中不包括以下哪种成分（）

A.引物B.dNTPC.模板DNAD.核糖体

4.引物设计时，其长度一般为（）

A.10-15bpB.15-30bpC.30-50bpD.50-100bp

5.进行PCR反应的仪器是（）

A.离心机B.移液器C.基因扩增仪D.电泳仪

6.PCR技术的发明人是（）

A.克里克B.沃森C.穆利斯D.桑格

7.若模板DNA含量较低，可通过（）提高PCR反应的灵敏度。

A.增加引物浓度B.降低退火温度C.增加循环次数D.提高延伸温度

8.退火温度一般比引物的Tm值低（）

A.1-2℃B.3-5℃C.5-10℃D.10-15℃

9.在PCR反应中，使DNA双链解开的步骤是（）

A.变性B.退火C.延伸D.冷却

10.PCR产物的特异性取决于（）

A.引物B.Taq酶C.dNTPD.模板浓度

答案：1.B2.C3.D4.B5.C6.C7.C8.B9.A10.A

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应的基本要素包括（）

A.模板DNAB.引物C.TaqDNA聚合酶D.dNTPE.缓冲液

2.引物设计的原则包括（）

A.长度合适B.避免引物二聚体形成C.GC含量适中D.3端尽量避免错配E.引物序列应特异性强

3.影响PCR反应的因素有（）

A.模板质量B.引物浓度C.酶量D.反应温度E.循环次数

4.PCR技术可应用于（）

A.基因诊断B.基因克隆C.法医鉴定D.物种鉴定E.疾病治疗

5.以下哪些属于PCR反应的步骤（）

A.变性B.退火C.延伸D.复性E.终止

6.选择TaqDNA聚合酶的原因有（）

A.耐高温B.具有5→3聚合酶活性C.具有3→5外切酶活性D.能特异性识别引物E.扩增效率高

7.PCR产物的分析方法有（）

A.琼脂糖凝胶电泳B.聚丙烯酰胺凝胶电泳C.测序D.酶切分析E.核酸杂交

8.在PCR实验中，需要注意的事项有（）

A.防止污染B.准确配制反应体系C.控制反应条件D.正确操作仪器E.做好实验记录

9.以下哪些情况可能导致PCR扩增失败（）

A.模板降解B.引物设计不合理C.退火温度过高D.Taq酶失活E.dNTP浓度过低

10.实时荧光定量PCR可用于（）

A.基因表达分析B.病原体定量检测C.单核苷酸多态性分析D.甲基化分析E.肿瘤标志物检测

答案：1.ABCDE2.ABCDE3.ABCDE4.ABCD5.ABC6.ABE7.ABCDE8.ABCDE9.ABCDE10.AB

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应中，引物与模板的结合是通过碱基互补配对原则。（）

2.TaqDNA聚合酶具有3→5外切酶活性，可保证扩增的准确性。（）

3.提高退火温度可以增加引物与模板的结合稳定性，一定能提高PCR扩增效果。（）

4.PCR反应体系中的缓冲液主要作用是维持反应体系的pH值。（）

5.引物浓度越高，PCR反应效果越好。（）

6.模板DNA的纯度对PCR反应结果没有影响。（）

7.PCR技术可以扩增任何长度的DNA片段。（）

8.实时荧光定量PCR能够对核酸进行绝对定量和相对定量分析。（）

9.在PCR实验中，只要仪器正常运行，就不需要对实验结