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pcr考试大题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的中文全称是（）

A.聚合酶链式反应

B.核酸内切酶反应

C.基因扩增反应

D.蛋白质合成反应

答案：A

2.PCR反应体系中不包含以下哪种成分（）

A.引物

B.dNTP

C.DNA模板

D.限制性内切酶

答案：D

3.以下哪种酶常用于PCR反应（）

A.TaqDNA聚合酶

B.反转录酶

C.碱性磷酸酶

D.溶菌酶

答案：A

4.PCR反应的基本步骤不包括（）

A.变性

B.退火

C.延伸

D.转化

答案：D

5.引物设计时，其长度一般为（）

A.5-10bp

B.15-30bp

C.30-50bp

D.50-100bp

答案：B

6.提高PCR反应特异性的关键是（）

A.提高退火温度

B.增加引物浓度

C.优化引物设计

D.加大模板量

答案：C

7.PCR反应中，退火温度一般比引物的Tm值低（）

A.1-2℃

B.3-5℃

C.5-10℃

D.10-15℃

答案：B

8.在PCR实验中，污染的主要来源不包括（）

A.模板核酸

B.实验室环境

C.实验器材

D.操作人员的正常呼吸

答案：D

9.实时荧光定量PCR技术不能用于（）

A.基因表达水平的定量分析

B.病原体核酸定量检测

C.基因分型

D.蛋白质含量测定

答案：D

10.以下哪种物质可以作为PCR反应的阳性对照（）

A.水

B.已知目的基因的模板

C.不含模板的反应体系

D.只含引物的体系

答案：B

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的应用领域包括（）

A.基因克隆

B.疾病诊断

C.法医鉴定

D.物种进化研究

答案：ABCD

2.影响PCR反应的因素有（）

A.引物质量

B.模板浓度

C.Mg2?浓度

D.反应温度和时间

答案：ABCD

3.设计PCR引物时需要考虑的因素有（）

A.引物的长度

B.引物的GC含量

C.引物自身及引物之间是否存在互补序列

D.引物的特异性

答案：ABCD

4.PCR反应体系中包含的成分有（）

A.缓冲液

B.引物

C.dNTP

D.DNA聚合酶

答案：ABCD

5.下列属于PCR技术特点的是（）

A.灵敏度高

B.特异性强

C.快速简便

D.能扩增未知序列

答案：ABC

6.实时荧光定量PCR的常用荧光化学方法有（）

A.荧光染料法

B.荧光探针法

C.化学发光法

D.放射性核素标记法

答案：AB

7.PCR实验中防止污染的措施有（）

A.严格分区操作

B.定期清洁实验仪器和环境

C.使用一次性耗材

D.设立阴性对照

答案：ABCD

8.巢式PCR的优点包括（）

A.提高扩增的特异性

B.提高扩增的灵敏度

C.可用于扩增较长片段

D.减少引物二聚体的形成

答案：AB

9.不对称PCR的应用有（）

A.制备单链DNA

B.测序模板制备

C.基因表达分析

D.突变检测

答案：AB

10.热启动PCR的作用是（）

A.减少非特异性扩增

B.提高扩增效率

C.增加引物的稳定性

D.降低引物二聚体的产生

答案：ABD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR技术可以扩增任意长度的DNA片段。（）

答案：错误

2.引物的GC含量越高，其退火温度越高。（）

答案：正确

3.TaqDNA聚合酶具有3→5外切酶活性。（）

答案：错误

4.PCR反应中模板DNA的浓度越高越好。（）

答案：错误

5.荧光定量PCR可以对基因进行绝对定量和相对定量分析。（）

答案：正确

6.引物在PCR反应中只起引导DNA合成起始的作用。（）

答案：错误

7.降落PCR可以提高PCR反应的特异性。（）

答案：正确

8.只要PCR反应结果出现条带，就说明扩增成功。（）

答案：错误

9.实验室环境中的核酸气溶胶不会导致PCR假阳性结果。（）

答案：错误

10.多重PCR可以在一个反应体系中同时扩增多个目的基因。（）

答案：正确

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR技术的基本原理。

答案：PCR基于DNA半保留复制原理。在高温下模板DNA变性解链，低温时引物与模板互补退火结合，适宜温度下Taq酶以dNTP为