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弱吸收细胞样品相位场定量测量技术的深度剖析与实践探索

一、引言

1.1研究背景与意义

在生物医学领域，对细胞的深入研究对于理解生命过程、疾病发生机制以及开发有效的诊断和治疗方法至关重要。许多细胞样品属于弱吸收物体，当光通过这些细胞时，其振幅变化极小，而相位变化则携带了丰富的细胞结构和生理状态信息，如细胞的三维形貌、折射率分布、干质量等。精确测量弱吸收细胞样品的相位场，能够为生物医学研究提供关键数据，助力疾病的早期诊断和精准治疗。

在疾病诊断方面，细胞的相位信息可作为生物标志物用于疾病的早期检测。例如，癌细胞与正常细胞在形态和折射率上存在差异，通过定量测量相位场，可以在疾病的早期阶段识别出这些细微变化，从而实现癌症的早筛和准确诊断，为患者争取更多的治疗时间和更好的治疗效果。在细胞研究中，相位场定量测量有助于深入了解细胞的生理过程，如细胞的生长、分裂、分化以及细胞间的相互作用。通过分析相位数据，可以获取细胞内部的结构信息，研究细胞器的分布和功能，揭示细胞生命活动的奥秘。此外，在药物研发中，相位测量技术可用于评估药物对细胞的作用效果，监测细胞对药物的反应，为药物筛选和优化提供重要依据。

1.2国内外研究现状

国内外众多科研团队在弱吸收细胞样品相位场定量测量技术方面展开了广泛而深入的研究，并取得了一系列重要成果。经典的相位测量技术多基于干涉成像原理，通过将参考光与透过样品的物光进行干涉，产生干涉条纹，再结合条纹分析、数值传播和相位解包裹等算法来解调样品的定量相位信息。这种方法为相位测量提供了一套较为可靠的光学计量手段，但由于其对相干性极高的照明光源以及精密校准的干涉测量光路有严格要求，且成像过程极易受到散斑噪声的干扰，在实际应用中受到了一定限制。

为了克服干涉相位测量的局限性，部分相干照明下的定量相位成像技术应运而生，如差分相衬、光强传输方程等方法，为实现更高质量的“非干涉”相位测量开辟了新路径。这类技术具有成像系统配置简单、易于实现，成像算法无需相位解包裹，成像结果具有更高的横向/轴向分辨率以及更强的鲁棒性等显著优势。然而，部分相干强度与物体传输呈现“双线性”特征，这种复杂关系使得强度-相位的求解机制难以直接建立。通常情况下，需要引入弱物体近似模型来线性化强度分布，进而推导相位反演算法。

但弱物体近似模型存在固有缺陷。一方面，该模型被描述为定性的、含糊的“相位较小的物体”，缺乏物理或数学上的明确定义；另一方面，相位重构的精确度受限于真实物体与近似模型的匹配程度。这两个局限性严重影响了定量相位成像的“定量”特性，导致无法为后续的细胞形态学分析、细胞干质量测量等提供精确、可靠的数据。

针对这些问题，南京理工大学陈钱教授和左超教授课题组通过理论分析与数值仿真，首次给出了弱物体近似的严格数学定义，明确了弱相位近似模型要求物体相位不大于0.5rad时，一步反卷积算法可实现精确定量相位重构；当物体相位大于0.5rad时，重构结果不再可靠。在此基础上，该团队引入赝弱物体近似模型，提出迭代反卷积的相位重构算法，突破了弱物体近似的限制，实现了对大相位物体的精确定量相位重构。

1.3研究目标与内容

本研究旨在发展一种高精度、高可靠性的弱吸收细胞样品相位场定量测量技术，克服现有技术的局限性，为生物医学研究提供更为准确和全面的细胞相位信息。具体研究内容包括：深入研究弱吸收细胞样品相位场定量测量的技术原理，明确不同测量方法的适用范围和优缺点；针对现有技术中弱物体近似模型的缺陷，探索新的相位反演算法，提高相位重构的精度和可靠性；结合先进的光学成像技术和图像处理算法，优化测量系统的性能，实现对细胞相位场的快速、准确测量；通过实验验证所提出技术和算法的有效性，对实际细胞样品进行相位场测量，并与传统方法进行对比分析，评估新方法在细胞研究和疾病诊断中的应用潜力。

二、弱吸收细胞样品特性及相位场基础理论

2.1弱吸收细胞样品特性分析

弱吸收细胞样品对光的吸收能力较弱，这意味着当光通过细胞时，光能转化为其他形式能量（如热能）的比例较小。细胞对光的吸收程度与细胞内的物质组成密切相关，例如，细胞内的蛋白质、核酸等生物大分子对不同波长的光具有特定的吸收特性。在可见光范围内，细胞对光的吸收相对较低，使得细胞在明场显微镜下呈现出近乎透明的状态，这给传统的基于光吸收成像的方法带来了挑战。

除了吸收，细胞还会对光产生散射作用。细胞内的各种细胞器、生物大分子以及细胞的边界等都会成为散射中心，导致光的传播方向发生改变。散射的程度和特性与细胞的结构和形态有关，较小的细胞器如核糖体等会产生瑞利散射，而较大的细胞器如线粒体则可能产生米氏散射。散射光的分布包含了细胞内部结构的信息，例如，通过分析散射光的角度分布，可以推断细胞内颗粒的大小和浓