离子交换层析技术原理与应用.pdfVIP

蛋白质的滴定曲线

acidisoelectricpointalkaline

excesspositivechargebalancedpositiveandneivechargeexcessneivecharge

n

i

e

tCOOH

o

r+

pRNH

n3

o

pH3pH10

e

g

r

aCOO-

h

c

l

lRNH

a2

r

eCOO-

v

o+

RNH

3

蛋白质所带有的电荷取决于pH

蛋白质在生理环境下通常是带电荷的！

不同宿主中蛋白质pI的分布

Archaeoglobusfulgidus(2420proteins)E.coli(4279proteins)

H.iens(27941proteins)

绝大部分的pI在

5.8或9附近

pI分布直方图

6

2022/10/21

SOURCE:Multi-modalityofpIdistributioninwholeproteomeSongfengetal,Proteomics,2006

为什么选择离子交换?

离子交换是一种可以在层析的各个阶段以及各种规模下广泛使

用的层析技术

–良好的可操控性Controllable

–高选择性Highselectivity

–高载量Highcapacity

–可以将样品浓缩Concentrating

–高回收率Highrecovery

离子交换层析原理

离子交换层析的应用

离子交换填料的选择

总结

怎样做离子交换

•层析步骤

•如何做

①选择合适的层析设备

②配制合适的缓冲液

③选择合适的层析填料

④样品准备

⑤洗脱方式

⑥填料的和再生