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基因编辑技术在细胞功能研究中的应用

目录

一、内容概括．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1.1基因组学时代的到来．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.1.2细胞功能研究的挑战与机遇．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

1.2基因编辑技术概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

1.2.1基本原理与发展历程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

1.2.2主要技术平台比较（如CRISPR/Cas9,ZFN,TALEN．．．．．．．．13

1.3细胞功能研究方法简介．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

1.3.1传统研究方法的局限性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

1.3.2基因编辑技术的优势．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

二、基因编辑技术的核心机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

2.1DNA修复途径．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

2.2蛋白质指导的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

2.2.1RNA依赖性核酸内切酶．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

2.2.2蛋白质DNA相互作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

三、基因编辑技术在细胞功能研究中的应用实例．．．．．．．．．．．．．．．36

3.1基因功能挖掘与验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

3.1.1条件性基因敲除/knockin．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

3.1.2单碱基突变引入与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

3.1.3基因表达调控研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

3.2疾病模型构建与病理机制探究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

3.2.1单基因遗传病模拟．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48

3.2.2复杂疾病相关基因研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49

3.2.3癌症等疾病模型建立．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50

3.3细胞信号通路解析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53

3.3.1关键信号分子鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．56

3.3.2通路调控网络构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．59

3.3.3药物靶点发现与验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．60

3.4细胞分化与再生研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．62

3.4.1干细胞定向分化诱导．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．64

3.4.2组织修复与再生机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．65

3.4.3神经再生等特定领域应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．66

四、基因编辑技术的研究策略创新．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．69

4.1基于基因编辑的筛选方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．70

4.2基于基因编辑的检测技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．71

4.2.1基因型表型关联分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．73

4.2.2细胞异质性研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．76

4.3基于基因编辑的基因治疗研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．78

4.3.1临床前研究模型验证．．．．．．