时间分辨乙肝应用-潭龙益讲课文档.pptVIP

时间分辨乙肝应用-潭龙益;放射免疫分析技术

radioimmunoassayRIA;缺点

125I的半衰期短而导致其试剂有效期短。

标记物125I的稳定性差，导致试剂盒批间、批内的变异较大；标准曲线有效期短，必须每次定标，造成浪费。

操作繁琐，出报告时间长。

无法保存备用。

放射性（125I），对环境的污染及对身体的危害，已经为重视环保的国家逐步取消。（如整个欧洲仅尚存几个放免试验室）;酶免疫分析法

enzyneimmunoassayEIA;缺点

对底物的显色遵循比尔定律，标准曲线的直线范围窄

灵敏度、重复性不及放免，易造成漏检和假阳性。

因酶的纯度和反应过程容易受环境因素影响，导致稳定性不好。;化学发光免疫分析法（CLIA）

chemiluminescenimmunoassay;缺点

发光过程短，样品不能重复检测。

本底较高，易受环境物质干扰。

试剂稳定性较差，需多次定标。

检测精度不高，在超微量分析及早期诊断方面能力不足。

非开放性试剂；试剂价格高。;电化学发光免疫分析（ECL）

electrochemiluminescence;电化学发光底物-

三联吡啶钌N羟基琥珀酰胺(NHS)酯;电极表面的电化学发光反应;本底较小、灵敏度较高、线性范围较宽。

可以作急诊;免疫荧光测定技术(IFA)

Immunofluorescenceassay;时间分辨荧光免疫分析技(TRFIA)

Time-ResoledFluoroimmunoassay;一、基本原理;;二、TRFIA的主要特点;酶联免疫 （精度：10-9mol/L）

放射免疫 （精度：10-12mol/L）

化学发光 （精度：10-15mol/L）

电化学发光 （精度：10-17mol/L）

时间分辨荧光（精度：10-18mol/L）

生物芯片;试剂 DELFIAImmuliteACS-180

AFP 0.1-1000IU/ml0.2-300IU/ml1.0-1000IU/m

CEA0.1-500ng/ml 0.2-500ng/ml0.5-100ng/ml

HCG 0.5-10000U/L5-5000U/L2-1000U/L

TSH 0.005-100μU/ml0.002-75μU/ml0.03-150μU/ml

FSH 0.05-256mU/ml0.1-170mU/m0.3-200mU/ml

Prog 0.08-120nmol/L无0.1-40ng/ml

Prolactin0.04-250ng/ml0.5-150ng/ml0.3-200ng/ml

;标记物

具有独特荧光特性的稀土金属

---镧系元素;;;;;4发射光谱很窄，50%的发射光谱宽度∠10nm，利用615±5范围的滤光片，只允许此波段内发射光通过并被检测，排除其它波长的荧光，一方面降低了背景，另一方面使能量消耗减少，提高提高检测灵敏度。;5Eu螯合物有相对高的比活性;常用标记物的相对比活性;（二）线性范围宽;标准曲线稳定，试剂保质期长;（三）重复性好;600;技术;三、应用;肿瘤科检查

AFPCEAPSAhTG，

β-2MicroNSEPAP

PSA（Free/Total）PSAEQM

CA-50CA-125CA-199

CA-153*CA-724*CY-211*;遗传科检查

产前筛查：hAFP/?HCG，PAPPA

新生儿筛查：Neo-TSH，Neo-T4，Neo-IRT，

Neo-17a-OHProg，PKU

核酸探针及基因杂交检测，多标记定量PCR检测。

肝炎系列

甲肝，乙肝，丙肝

血液科检测

贫血检查： Ferritin，VitB12，Folicacid

白血病： 免疫细胞分型等;细胞学检查

细胞毒试验等多种检测项目，细胞质及组织化学分析等多种检测项目

酶类检测及细胞受体检测（包括MHC，HLA等多种检测）

科研工具

单标记检测，双标记检测，三标记检测，四标记检测;时间分辨荧光免疫测定技术

在病毒性肝炎诊断和疗效监测中的应用;病毒性肝炎的种类

HepatitisAVirus

HepatitisBVirus

HepatitisCVi