HPLC 测定含量公式全解析:方法分类、推导与实操应用.docxVIP

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HPLC测定含量公式全解析:方法分类、推导与实操应用

HPLC(高效液相色谱)通过物质在色谱柱中的保留行为与响应信号(峰面积/峰高)定量分析样品含量,核心公式基于“响应值与浓度成正比”的朗伯-比尔定律推导,主要分为外标法(常用)、内标法(精准度高)及归一化法(适用于多组分同时测定)三类。以下结合公式推导、参数定义、实例计算及实操要点,系统梳理含量测定逻辑。

一、核心理论基础:朗伯-比尔定律与响应值关系

HPLC定量的核心依据是朗伯-比尔定律,即当色谱条件(流动相、流速、柱温等)稳定时,待测物质的响应信号(峰面积A或峰高H)与其浓度c成正比,数学表达式为:

A

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