安徽pcr上岗证考试题及答案.docVIP

安徽pcr上岗证考试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的基本原理是（B）。

A.基因重组

B.基因扩增

C.基因测序

D.基因编辑

2.在PCR反应中，通常使用的DNA聚合酶是（A）。

A.Taq聚合酶

B.DNA聚合酶I

C.RNA聚合酶

D.蛋白酶K

3.PCR反应体系中，通常需要加入的引物数量是（C）。

A.1对

B.2对

C.3对

D.4对

4.PCR反应的退火温度通常是根据（B）来确定的。

A.引物的长度

B.引物的Tm值

C.DNA模板的长度

D.DNA聚合酶的种类

5.PCR反应的延伸温度通常是在（A）之间。

A.72℃

B.60℃

C.37℃

D.95℃

6.在PCR反应中，用于检测PCR产品的工具是（C）。

A.水平电泳

B.垂直电泳

C.凝胶电泳

D.薄层色谱

7.PCR反应中，用于去除PCR抑制物的试剂是（B）。

A.蛋白酶K

B.乙醇

C.氯仿

D.异丙醇

8.PCR反应中，用于增加PCR灵敏度的技术是（A）。

A.巢式PCR

B.RT-PCR

C.实时PCR

D.LDR-PCR

9.PCR反应中，用于检测特定基因突变的技朧是（C）。

A.巢式PCR

B.RT-PCR

C.变性梯度凝胶电泳

D.实时PCR

10.PCR反应中，用于检测PCR产物特异性的工具是（B）。

A.水平电泳

B.DNA测序

C.垂直电泳

D.薄层色谱

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应体系中，通常包含的成分有（ABCD）。

A.DNA模板

B.引物

C.DNA聚合酶

D.dNTPs

2.PCR反应的三个主要步骤是（ABC）。

A.变性

B.退火

C.延伸

D.聚合

3.PCR反应中，影响PCR效率的因素有（ABCD）。

A.引物的Tm值

B.DNA模板的质量

C.DNA聚合酶的活性

D.dNTPs的浓度

4.PCR反应中，用于去除PCR抑制物的方法有（AB）。

A.DNA纯化

B.蛋白酶K处理

C.乙醇沉淀

D.氯仿萃取

5.PCR反应中，用于检测PCR产品的技术有（ABCD）。

A.凝胶电泳

B.DNA测序

C.实时PCR

D.水平电泳

6.PCR反应中，用于增加PCR灵敏度的技术有（AB）。

A.巢式PCR

B.实时PCR

C.RT-PCR

D.LDR-PCR

7.PCR反应中，用于检测特定基因突变的技朧有（AB）。

A.变性梯度凝胶电泳

B.DNA测序

C.巢式PCR

D.实时PCR

8.PCR反应中，用于检测PCR产物特异性的工具有（AB）。

A.DNA测序

B.凝胶电泳

C.水平电泳

D.薄层色谱

9.PCR反应中，常用的DNA聚合酶有（AB）。

A.Taq聚合酶

B.Pfu聚合酶

C.RNA聚合酶

D.蛋白酶K

10.PCR反应中，常用的引物设计软件有（AB）。

A.Primer3

B.Oligo

C.DNAStar

D.Geneious

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应只能在实验室中进行。（×）

2.PCR反应不需要DNA模板。（×）

3.PCR反应的退火温度越高，PCR效率越高。（×）

4.PCR反应的延伸温度越高，PCR效率越高。（×）

5.PCR反应中，引物的Tm值应该相同。（×）

6.PCR反应中，DNA聚合酶的活性越高，PCR效率越高。（√）

7.PCR反应中，dNTPs的浓度越高，PCR效率越高。（×）

8.PCR反应中，PCR抑制物会影响PCR效率。（√）

9.PCR反应中，凝胶电泳可以用于检测PCR产物。（√）

10.PCR反应中，实时PCR可以用于检测PCR产物。（√）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR反应的基本原理。

PCR反应的基本原理是利用DNA聚合酶在引物的作用下，以DNA模板为模板，合成新的DNA链。PCR反应包括变性、退火和延伸三个步骤。变性步骤中，高温使DNA双链分离成单链；退火步骤中，低温使引物与DNA模板结合；延伸步骤中，DNA聚合酶在引物的作用下，以DNA模板为模板，合成新的DNA链。

2.简述PCR反应的三个主要步骤。

PCR反应的三个主要步骤是变性、退火和延伸。变性步骤中，高温使DNA双链分离成单链；退火步骤中，低温使引物与DNA模板结合；延伸步骤中，DNA聚合酶在引物的作用下，以DNA模板为模板，合成新的DNA链。

3.简述PCR反应中，影响PCR效率的因素。

PCR反应中，影响PCR效率的因素有引物的Tm值、DNA模板的质量、DNA聚合酶的活性和dNTPs的浓度。引物的Tm