刺龙牙根腐病诊断及防治技术规程DB21T 4198-2025.docxVIP

ICS65.020.20CCSB15

DB21

辽宁省地方标准

DB21/T4198—2025

刺龙牙根腐病诊断及防治技术规程

TechnicalregulationfordiagnosisandcontrolofAraliaelatarootrotdisease

2025-10-30发布

2025-11-30实施

辽宁省市场监督管理局发布

I

DB21/T4198—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由辽宁省林业和草原局提出并归口。

本文件起草单位：辽宁省经济林研究所、辽宁省森林经营研究所。

本文件主要起草人：郑泽洋、刘振盼、刘娟娟、孙俊、李玉莹、苏蕾、王克瀚、刘广平、卢立媛、张慧东、金鑫、高鹤、付钰、林晓坤、王学东、温福欣、常婧、李森远、商成林、穆怡陶、任万福。

本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。

归口管理部门通讯地址：辽宁省林业和草原局（辽宁省沈阳市和平区太原北街2号），联系电话：024

文件起草单位通讯地址：辽宁省经济林研究所（辽宁省大连市甘井子区中华西路31号），联系电话：0411

DB21/T4198—2025

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刺龙牙根腐病诊断及防治技术规程

1范围

本文件规定了刺龙牙根腐病诊断及防治技术的术语和定义、病害诊断、病原菌鉴定、病害防治等技术要求。

本文件适用于辽宁地区刺龙牙根腐病诊断及防治。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T8321.10农药合理使用准则（十）

GB20287农用微生物菌剂

NY/T496肥料合理使用准则通则

NY/T1276农药安全使用规范准则

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

刺龙牙Araliaelata

别名：刺嫩芽，为五加科楤木属多年生落叶小乔木。

3.2

刺龙牙根腐病Araliaelatarootrotdisease

由尖孢镰刀菌FusariumoxysporumSchltdl.和恶疫霉菌Phytophthoracactorum(Leb.etCohn)Schroet引起刺龙牙根部腐烂的病害。

4病害诊断

4.1症状诊断

根据病害田间症状特点初步判断病害种类，诊断标准见附录A。

4.2病原诊断

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DB21/T4198—2025

4.2.1主要仪器

高压灭菌锅、恒温培养箱、超净工作台、光学显微镜、离心机、PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、涡旋振荡器、全温振荡培养箱、超低温冰箱等。

4.2.2主要培养基及试剂

马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）、马铃薯葡萄糖液体培养基（PDB）、康乃馨叶片琼脂培养基（CLA）、大豆琼脂培养基（SA）、大豆汁培养基、无水乙醇、NaClO、真菌基因组DNA提取试剂盒、琼脂糖、50×TAE电泳液、DNAmarker、2×EsTaqMasterMix等。

4.2.3病原菌分离纯化

采用组织分离法进行病原菌分离。选取感病植株的根组织，洗净晾干。从病健交界处切取5mm×5mm小块，放入75%乙醇中浸泡30s，再置于3%NaClO中浸泡2min，后以无菌水清洗3次，在无菌滤纸上吸干残余水分后转入培养基中培养，待培养物产生孢子后进行单孢分离，获得纯培养物。

4.2.4病原菌培养及孢子形态观察

将分离纯化后得到的病原菌转接于PDA或SA培养基中，25℃下黑暗培养7d，观察菌落形态及颜色。将病原菌转接于CLA或SA培养基中，25℃下黑暗培养10d-20d，观察分生孢子、厚垣孢子、孢子囊、卵孢子大小及形态。

4.2.5柯赫氏法则验证病原

尖孢镰刀菌和恶疫霉菌接于PDA或SA培养基上生长7d后，挑取边缘菌丝块至PDB或大豆汁液体培养基中，25℃、160rpm/min振荡培养5d-7d，用血球计数板调整孢子液浓度为1×107个/mL；取

50mL孢子液灌根于刺龙牙植株根部，以PDB或大豆汁液体培养基为对照，