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细胞治疗细胞冻存考试试卷与答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.细胞冻存常用的保护剂是（）

A.乙醇B.DMSOC.甘油D.丙酮

2.细胞冻存时，一般冻存管内细胞悬液体积为（）

A.1mlB.2mlC.3mlD.4ml

3.细胞冻存的最佳温度是（）

A.-20℃B.-80℃C.-196℃D.4℃

4.复苏细胞时，快速解冻的温度是（）

A.25℃B.37℃C.42℃D.50℃

5.细胞冻存液中血清的比例一般是（）

A.10%B.20%C.50%D.80%

6.冻存细胞时，以下操作正确的是（）

A.直接放入-80℃冰箱B.先在4℃冰箱放置1h

C.梯度降温D.先在37℃孵育10min

7.细胞复苏后，首先要进行的操作是（）

A.换液B.传代C.计数D.观察形态

8.冻存细胞复苏后，活率一般要求达到（）

A.50%以上B.60%以上C.70%以上D.80%以上

9.细胞冻存管的标记不包括（）

A.细胞名称B.冻存日期C.操作人员D.细胞来源

10.以下哪种细胞不适合长时间冻存（）

A.干细胞B.肿瘤细胞C.红细胞D.成纤维细胞

二、多项选择题（每题2分，共20分）

1.细胞冻存的目的包括（）

A.长期保存细胞B.减少细胞污染

C.便于运输D.降低细胞成本

2.细胞冻存液的成分通常有（）

A.血清B.保护剂C.培养基D.抗生素

3.细胞冻存过程中可能出现的问题有（）

A.细胞死亡B.冰晶形成C.污染D.冻存管破裂

4.复苏细胞时需要注意（）

A.快速解冻B.无菌操作C.及时换液D.观察细胞状态

5.影响细胞冻存效果的因素有（）

A.细胞密度B.冻存保护剂浓度C.降温速度D.复苏方法

6.常用的细胞冻存设备有（）

A.液氮罐B.-80℃冰箱C.超净工作台D.离心机

7.细胞冻存记录应包含（）

A.细胞名称B.冻存日期C.冻存条件D.复苏情况

8.以下哪些细胞适合冻存（）

A.原代细胞B.细胞系C.胚胎干细胞D.造血干细胞

9.细胞冻存和复苏过程中，正确的操作有（）

A.冻存前对细胞进行计数和活力检测

B.复苏时轻轻吹打细胞

C.冻存管密封良好

D.复苏后直接传代

10.细胞冻存的质量控制指标包括（）

A.细胞活率B.细胞形态C.细胞功能D.细胞数量

三、判断题（每题2分，共20分）

1.细胞冻存时，冻存液可以直接加入细胞悬液中。（）

2.复苏细胞时，温度越高解冻越快越好。（）

3.冻存细胞的活力不受冻存时间影响。（）

4.细胞冻存管可以重复使用。（）

5.细胞冻存过程中，降温速度越快越好。（）

6.复苏后的细胞不需要进行质量检测。（）

7.细胞冻存液中保护剂浓度越高对细胞保护越好。（）

8.液氮罐中的液氮不需要定期补充。（）

9.标记冻存管时，可以用普通记号笔。（）

10.不同类型的细胞冻存条件相同。（）

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述细胞冻存的基本步骤。

2.细胞复苏时为何要快速解冻？

3.简述选择细胞冻存保护剂的原则。

4.冻存细胞复苏后活率低可能的原因有哪些？

五、讨论题（每题5分，共20分）

1.如何优化细胞冻存方案以提高细胞复苏后的活力？

2.探讨细胞冻存过程中污染问题的来源及预防措施。

3.比较不同细胞冻存设备的优缺点。

4.谈谈细胞冻存在细胞治疗领域的重要性及面临的挑战。

答案

一、单项选择题

1.B

2.B

3.C

4.B

5.B

6.C

7.A

8.D

9.D

10.C

二、多项选择题

1.ABC

2.ABC

3.ABCD

4.ABCD

5.ABCD

6.AB

7.ABCD

8.ABCD

9.ABC

10.ABC

三、判断题

1.×

2.×

3.×

4.×

5.×

6.×

7.×

8.×

9.×

10.×

四、简答题

1.制备细胞悬液，计数调整细胞密度；将冻存液与细胞悬液按比例混合；将细胞悬液分装入冻存管；梯度降温，先4℃1h，-20℃2h，再-80℃过夜，最后放入液氮保存。

2.快速解冻可防止缓慢解冻过程中形成大冰晶，大冰晶会损伤细胞结构，快速解冻能减少对细胞的物理损伤，提高细胞复苏活力。

3.对细胞无毒性，能有效降低冰点，在低温下保持良好的化学稳定性，容易去除且不影响细胞后续生长和功能。

4.冻存过程中降温速度不当、冻存保护剂浓度不合适、复苏操作不规范、冻存时间过长、细胞冻存前状态不佳等。

五、讨论题

1.优化包括调整冻存液配方、改进降温程序、选择合适的冻存设备、控制细胞冻存密度等，通过实验对比不同条件下细胞复苏活力找到最佳方案。

2.污染来源可能是操作环境不洁净、冻存液污染、细胞本身带菌等。预防措施有严格无菌操作、对冻存液等耗材灭菌处理、冻存前检测细胞是否污染等。

3.液氮罐储存温度低且稳定，适合长期保存，但需定期补充液氮，使用不便；-80℃冰箱使用方便，但保存时间相对短，温度波动相对较大。