DB2310T 118-2024 灵芝液体菌种生产技术规程.docxVIP

ICS65.020.20CCSB39

2310

牡丹江市地方标准

DB2310/T118—2024

灵芝液体菌种生产技术规程

2024-01-31发布2024-03-02实施

牡丹江市市场监督管理局发布

DB2310/T118—2024

I

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由黑龙江省农业科学院牡丹江分院和牡丹江镜心湖菌业有限公司提出。

本文件起草单位：黑龙江省农业科学院牡丹江分院、牡丹江镜心湖菌业有限公司、佳木斯大学、牡丹江医科大学。

本文件主要起草人：于海洋、王延锋、黄涛、吴薇、史磊、王金贺、刘姿彤、盛春鸽、张鹏、赵静、董雪梅、王远杭、潘春磊、闫水华、侯延国、王菲。

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灵芝液体菌种生产技术规程

1范围

本文件规范了灵芝（Ganodermalucidum）液体菌种生产环境卫生要求、生产设施与设备、菌种选择、生产工艺、发酵罐液体种质量要求、生产档案。

本文件适用于灵芝液体菌种制备。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB5749生活饮用水卫生标准

GB/T12728食用菌术语

GB50073洁净厂房设计规范

NY/T528食用菌菌种生产技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

灵芝液体菌种

用于生产和销售的灵芝菌丝体及生长基质组成的液体繁殖材料，包括用于发酵罐菌种扩繁的液体菌种、用于代料栽培的发酵罐菌种。

3.2

液体菌种发酵罐

进行食用菌液体菌种培养的专用设备。

3.3

起始pH

液体培养基配置后的初始pH。

3.4

发酵罐空消

对投料前的发酵罐进行高压蒸汽灭菌。

3.5

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发酵罐实消

对投料后的发酵罐进行高压蒸汽灭菌。

3.6

接种量

接入种子液的体积和接种后培养基体积的比例。

3.7

放罐

发酵液从发酵罐释放出来，进行后续处理的操作。

3.8

终止pH

液体菌种达到放罐指标时的培养基pH。

4环境卫生要求

4.1生产环境

生产环境应符合NY/T528的规定。

4.2生产车间

应符合GB50073的规定。

5生产设施与设备

5.1设施

菌种制作室、灭菌室、无菌接种室、恒温培养室、摇瓶培养室、发酵配料室、液体菌种培养室、化验室等。

5.2设备

5.2.1生产设备

发酵罐、空气压缩机、空气过滤器、高压蒸汽灭菌锅、净化工作台、恒温回旋式振荡器、备用电源（发电机）。

5.2.2检验设备

恒温培养箱、冰箱、显微镜、天平、pH计等。

5.2.3生产用具

玻璃三角瓶、接种火环圈、试管、量筒、玻璃漏斗、定量定性滤纸等生物实验室常规用品。

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5.2.4培养原料

应符合NY/T528要求，不溶水的固体物料粉碎后过40目筛。

6菌种选择

经省级以上农作物品种审定委员会审（认）定或登记（备案）或选择抗逆性强、抗杂菌能力强、菌丝生长健壮、产量高的灵芝菌种。

7生产工艺

7.1工艺流程

母种→摇瓶菌种→液体发酵罐菌种→放罐。

7.2生产要求

7.2.1母种制作

按照NY/T528要求制作母种。

7.2.2摇瓶菌种制备

7.2.2.1培养基制备

按照附录A.1配方配制培养基，用水符合GB5749要求，摇瓶使用500mL～1000mL、耐126℃高温无色三角瓶，裝液量为容器容量三分之一，分装后封口，121℃灭菌30min，放入超净工作台中自然冷却至25℃~28℃。

7.2.2.2接种培养

无菌条件下，接种铲接种黄豆粒大小菌种10块～15块，置于恒温振荡器中150r/min～180r/min，培养8d～10d，培养温度控制在25℃~28℃。

7.2.2.3检查

定期检查，及时去除污染或异常菌种，留样用于检验。

7.2.3液体菌种制备

7.2.3.1投料前准备

检测发酵罐体全部阀门、压力表、控制面板是否完好；内外流水冲洗，无死角，内壁无残留；发酵罐中加入三分之二水，关闭入料口阀门，打开排气阀，通电、通气，压力维持0.11M