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重庆医科大学
2010级硕士研究生《蛋白质组学》试题
姓名:学号:所在大班:
专业:得分:
交卷时间:2010.1.10交卷地点:东大楼810房间
交卷方式:各大班科代表收集并按学号顺序整理后上交
一、解释(共25分)
1、MALDITOFMS(10分)
2、亚细胞蛋白质组学(5分)
3、免疫共沉淀(5分)
4、激光共聚焦扫描显微技术(5分)
二、问答题(共75分)
1、简述2DE的原理及该技术的特点(10分)。
2、简述血浆/血清蛋白质组研究中需要着重注意的问题(11分)。
3、简述药物蛋白质组学定义及主要研究领域。试举例说明其在药物
靶点的发现和确认中的应用(12分)。
4、将文献ProteomeAnalysisofHepatocellularCarcinomaby
Two-dimensionalDifferenceGelElectrophoresis(FuchuHeet
al,MolecularCellularProteomics6:1798-1808,2007)中的
ABSTRACT翻译成中文(10分)。
5、简述目前的蛋白质组学技术在医学研究中的优势和不足(12分)。
6、简述神经蛋白质组学研究标本的种类及其优缺点(10分)。
7、简述Lasercapturemicrodissection(LCM)technology并举
例说明其在蛋白组学研究中的应用价值(10分)。
MALDITOFMS
即基质辅助激光解析离子化/飞行时间质谱,是近年来发展起来的一种新型的软电离
生物质谱,仪器主要由两部分组成:基质辅助激光解析电离离子源(MALDI)和飞行
时间质量分析器(TOF)。MALDI的原理是利用一定波长的激光脉冲,在极短的时间
间隔内,对含被测样品靶物的一个微小区域提供高能量,从固相直接获得离子的电离
方法。因此它是一种软电离技术,适用于混合物及生物大分子的测定,并特别适用于
对热敏感化合物或不会发化合物的离子化。TOF的离子分离是用非磁方式达到的,离
子在离子源中形成后被电场加速,进入真空无场漂移区,具有不同质荷比的离子因其
通过漂移区的时间不同而实现分离,先后到达检测器而产生信号。MALDI-TOF-MS
无论在理论上还是在技术上都十分简单、高效、快速、准确,并且质量测定范围大,
故为生命科学等领域提供了一种强有力的分析测试手段,并正扮演着越来越重要的作
用。
亚细胞蛋白质组学
亚细胞蛋白质组学是以亚细胞结构如亚细胞区室、特定蛋白质组分、细胞器等所包含的
所有蛋白质为研究对象的一个蛋白质组学的分支学科。亚细胞结构在细胞的生命活动中都与
特定的细胞功能相联系。分离、鉴定其在不同生理状态下的蛋白质表达情况对于全面了解细
胞的功能具有重要意义。由于亚细胞蛋白质组学研究的着眼点在蛋白质组的特定成分,而非
整个蛋白质组,就有效的能够有效弥补目前蛋白质组研究方法学上的不足。即一方面可以为
我们提供更多生命活动的本质、细胞功能紊乱的分子机制等信息。另一方面多种疾病相关的
基因表达产物与某些特定的细胞器相关联,直接分析这些细胞器的蛋白质表达变化,能够更
容易、更快速地寻找到有诊断、治疗价值的信息。
二.
Two-dimensionalGelElectrophoresis:
即双向凝胶电泳(2-DE),该技术是根据蛋白质的等电点和分子量的差异,连续进行垂直方
向的两次电泳而将待测蛋白质进行分离。第一向为等电聚焦(IEF)电泳,其基本原理是利
用蛋白质分子的等电点的不同进行蛋白质的分离。第二向为十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝
胶电泳(SDS—PAGE),其基本原理是利用蛋白质分子量大小的不同进行蛋白质分离,从而
把复杂蛋白质混合物在二维平面上分开。该技术是目前蛋白质组学研究中分辨率最高,信息
量最大的分离技术,是比较蛋白质组学研究中也是不可取少的手段。
药物蛋白质组学的主要研究领域有哪些?
答:药物蛋白质组学的主要研究领域包括:
1.药物作用靶点的蛋白质组学研究。药物蛋白质组学在蛋白质组学的基础上,通过系统
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