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脂多糖刺激对奶牛输卵管上皮细胞PGE2和PGF2α合成分泌的影响：机制与调控研究

1.引言

奶牛繁殖效率是奶牛养殖业的关键指标之一，而输卵管在奶牛生殖过程中起着至关重要的作用。输卵管上皮细胞（BOEC）不仅为配子运输、受精以及早期胚胎发育提供适宜的微环境，还参与多种生殖生理过程的调节。

脂多糖（LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分，在奶牛养殖环境中广泛存在。当奶牛发生生殖道感染，尤其是由革兰氏阴性菌引起的感染时，LPS会大量释放并作用于输卵管上皮细胞。前列腺素E2（PGE2）和前列腺素F2α（PGF2α）是一类具有广泛生物学活性的脂质介质，在奶牛生殖生理过程中，如发情周期调控、黄体溶解、胚胎着床等方面发挥着关键作用。

深入研究LPS刺激对BOEC中PGE2和PGF2α合成分泌的影响及其机制与调控，有助于揭示奶牛生殖道感染影响繁殖性能的分子机制，为开发有效的防治策略提供理论依据。

2.脂多糖、前列腺素的生物学特性及在奶牛生殖中的作用

2.1脂多糖的生物学特性

LPS由脂质A、核心多糖和O特异性多糖三部分组成。脂质A是LPS的毒性部分，具有高度保守性。当LPS进入机体后，可与Toll样受体4（TLR4）等模式识别受体结合，激活下游信号通路，引发炎症反应。在奶牛生殖道内，LPS可来源于感染的革兰氏阴性菌，如大肠杆菌等。

2.2前列腺素的生物学特性及在奶牛生殖中的作用

PGE2和PGF2α属于花生四烯酸（AA）的代谢产物。AA在磷脂酶A2（PLA2）的作用下从细胞膜磷脂中释放出来，然后在环氧化酶（COX）的催化下生成前列腺素内过氧化物，再经过不同的前列腺素合成酶的作用分别生成PGE2和PGF2α。

在奶牛生殖过程中，PGE2具有促进子宫和输卵管平滑肌舒张、维持黄体功能、促进胚胎着床等作用。而PGF2α则主要参与黄体溶解过程，使黄体细胞凋亡，导致孕酮水平下降，从而启动新一轮的发情周期。

3.脂多糖刺激对奶牛输卵管上皮细胞PGE2和PGF2α合成分泌的影响

3.1体外实验研究

在体外培养的BOEC中添加不同浓度的LPS进行刺激。研究发现，随着LPS浓度的增加和刺激时间的延长，BOEC中PGE2和PGF2α的合成分泌量呈现先升高后降低的趋势。低浓度LPS（如1μg/mL）刺激短时间（如6h）后，PGE2和PGF2α的分泌量显著增加，这可能是由于LPS激活了细胞内的炎症信号通路，促进了相关合成酶的表达和活性。

当LPS浓度过高（如10μg/mL）或刺激时间过长（如24h）时，细胞可能发生损伤，导致PGE2和PGF2α的合成和分泌受到抑制。

3.2体内实验研究

通过向奶牛输卵管内注入LPS模拟生殖道感染。结果显示，注入LPS后，输卵管局部组织中PGE2和PGF2α的含量明显升高。同时，血液中PGE2和PGF2α的水平也有一定程度的变化。这表明LPS刺激在体内也能影响BOEC对PGE2和PGF2α的合成分泌，并且这种影响可能会波及到全身的生理状态。

4.脂多糖刺激影响奶牛输卵管上皮细胞PGE2和PGF2α合成分泌的机制

4.1信号通路激活

LPS主要通过与BOEC表面的TLR4结合，激活下游的髓样分化因子88（MyD88）依赖和非依赖的信号通路。在MyD88依赖的信号通路中，TLR4与MyD88结合后，依次激活白细胞介素1受体相关激酶（IRAK）和肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6），进而激活核因子κB（NFκB）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路。

NFκB进入细胞核后，可上调COX2和前列腺素合成酶的基因表达，促进PGE2和PGF2α的合成。MAPK家族中的细胞外信号调节激酶（ERK）、cJun氨基末端激酶（JNK）和p38MAPK也参与了这一过程，它们可以通过磷酸化作用调节相关合成酶的活性。

4.2基因表达调控

LPS刺激可使BOEC中COX2、PGE合成酶（PGES）和PGF合成酶（PGFS）的基因表达水平发生变化。COX2是前列腺素合成的关键限速酶，在LPS刺激下，COX2的mRNA和蛋白表达水平显著升高，从而增加了前列腺素的合成底物。

同时，PGES和PGFS的表达也会受到LPS的影响，不同的细胞内信号通路可能对它们的表达进行差异性调控，从而影响PGE2和PGF2α的相对合成比例。

5.奶牛输卵管上皮细胞PGE2和PGF2α合成分泌的调控因素

5.1细胞因子的调控

白细胞介素1β（IL1β）、肿瘤坏死因子α（TNFα）等细胞因子在LPS刺激的BOEC中大量分泌。这些细胞因子可以通过旁分泌或自分泌的方式作用于BOEC，进一步调节PGE2和PGF2α的合成分泌。例如，IL1β可以激活NFκB和MAPK信号