细菌初步鉴定实训指导.pptxVIP

技能一细菌病的实验室诊断第五部分细菌的初步鉴定—细菌的革兰氏染色法细菌的生化试验

细菌的初步鉴定一、实训目的1、掌握革兰氏染色的原理及方法；2、掌握细菌生化试验原理及方法；3、掌握普通光学显微镜的使用及细菌的形态学观察。

细菌的初步鉴定二、实训内容对待鉴定的菌种进行革兰氏染色，观察形态；对待鉴定的菌种要明确已经获得纯化培养，有单个菌落可以进行生化试验。

细菌的初步鉴定培养的细菌、生化鉴定管、酒精灯、接种环、恒温箱、革兰氏染色液、载玻片、滤纸、普通光学显微镜三、实训材料

细菌的初步鉴定四、实训方法及步骤01（一）细菌的革兰氏染色涂片：右手持接种环灼烧灭菌后取2～3环生理盐水，置于载玻片中央，然后将接种环在火焰上灭菌，冷却后，从培养皿内取少许菌落，置于生理盐水中混匀，涂成直径1-1.5cm的涂膜，此膜应既薄又均匀为好。

细菌的初步鉴定四、实训方法及步骤干燥：涂片最好在室温中自然干燥。必要时，可将标本面向上，在离酒精灯火焰远处烘干，切勿紧靠火焰，以免标本糊焦而不能检查。02（一）细菌的革兰氏染色

细菌的初步鉴定四、实训方法及步骤火焰固定：将已干燥好的抹片，使涂面向上，以钟摆速度通过酒精灯火焰4次，使固定后的标本触及皮肤时，稍感烧烫为度。放置冷却后，进行染色。03（一）细菌的革兰氏染色

细菌的初步鉴定在已干燥、固定好的抹片上，涂片①滴加草酸铵结晶紫染色液，经1～2min，水洗革兰氏染色步骤

细菌的初步鉴定②加革兰氏碘液于抹片上媒染，经1～2min，水洗③加95%酒精于抹片上脱色，约30s，水洗革兰氏染色步骤

细菌的初步鉴定④加石炭酸复红液复染，30s，水洗，滤纸吸干后镜检革兰氏染色步骤

细菌的初步鉴定革兰氏染色步骤结果：革兰氏阳性细菌呈蓝紫色，革兰氏阴性细菌呈红色。

细菌的初步鉴定四、实训方法及步骤1.右手持接种环于酒精灯上灼烧灭菌，待冷；2.选取一典型的单个菌落，勾一环接种至生化管中，注意无菌操作；3.胶布封口，做标记；4.置37℃培养18-24h观察结果。（二）细菌的生化试验

细菌的初步鉴定五、实训结果革兰氏染色结果。01生化试验结果。02

六、实训注意事项1、提高个人生物安全意识及做好个人生物安全保护。2、建立无菌操作意识。3、培养认真细致的学习态度。细菌的初步鉴定