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考研免疫学2025年免疫学技术试卷（含答案）

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每题2分，共20分）

1.在进行ELISA实验时，为了防止非特异性结合，包被板和酶标二抗的封闭通常使用哪种物质？

A.BSA

B.SDS

C.TritonX-100

D.甘露醇

2.流式细胞术（FACS）最核心的原理是利用什么对细胞进行单参数或多参数的测量和分选？

A.显微镜成像

B.激光激发和光电倍增管检测

C.电镜观察细胞超微结构

D.细胞培养技术

3.WesternBlotting实验中，将蛋白质转移到固相膜（如PVDF或NC膜）的主要驱动力是？

A.离子交换

B.范德华力

C.亲水性相互作用

D.电动场

4.用于检测细胞表面或内部的特定抗原分子，且灵敏度极高，常用于稀有细胞分选的技术是？

A.ELISPOT

B.MACS（磁珠分选）

C.FACS（流式细胞术）

D.CytotoxicityAssay

5.PCR（聚合酶链式反应）技术能够特异性扩增目的DNA片段的关键在于？

A.高温变性

B.低温复性

C.中温延伸

D.特异性引物

6.在细胞因子检测的ELISA中，如果待测样本中存在高浓度的干扰物质，可能导致结果偏高，这种干扰物质最可能是？

A.细胞裂解液

B.内源性生物素或过氧化物

C.高浓度的天然细胞因子

D.封闭剂未封闭到位

7.用于分离纯化特定细胞亚群（如CD+T细胞）的最常用物理方法是？

A.免疫印迹

B.亲和层析

C.离心

D.磁珠负选或正选

8.WesternBlotting实验中，用于检测目的蛋白条带，且常用于半定量分析的酶标二抗是？

A.辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗鼠IgG

B.荧光标记的抗体

C.碱性磷酸酶（AP）标记的抗体

D.荧光素标记的抗体

9.检测极低浓度细胞因子（如单个细胞分泌的细胞因子）的常用技术是？

A.全细胞ELISA

B.双抗体夹心ELISA

C.ELISPOT

D.沉淀实验

10.用于检测核酸序列变异（如点突变、插入缺失）的PCR衍生技术是？

A.RT-PCR

B.RFLP

C.NestedPCR

D.DigitalPCR

二、名词解释（每题3分，共15分）

1.亲和层析

2.流式细胞术（FACS）

3.信号转导

4.ELISPOT

5.PCR

三、简答题（每题5分，共20分）

1.简述ELISA技术的基本原理及其主要应用类型。

2.简述WesternBlotting实验的主要步骤。

3.简述流式细胞术（FACS）的基本原理及其至少两种应用。

4.简述PCR反应体系中通常包含哪些核心组分及其作用。

四、论述题（每题10分，共30分）

1.比较ELISA和ELISPOT技术在细胞因子检测方面的主要区别和各自的优势。

2.详细说明在进行WesternBlotting实验时，为了获得清晰、可靠的实验结果，需要注意哪些关键环节？

3.论述选择合适的免疫学实验技术进行一项研究的意义，并举例说明在不同研究目的下应如何选择技术。

五、实验设计题（10分）

设计一个实验方案，用于初步验证某种刺激因子（如LPS）能否诱导人外周血单个核细胞（PBMCs）分泌IL-6细胞因子。简述实验的主要步骤，包括细胞处理、刺激、细胞因子检测等环节，并说明需要使用的关键试剂和技术。

试卷答案

一、选择题

1.A

2.B

3.D

4.C

5.D

6.B

7.D

8.A

9.C

10.B

解析：

1.A.BSA（牛血清白蛋白）是常用的封闭剂，能封闭ELISA板孔表面非特异性位点，防止干扰物质结合。SDS是去污剂，TritonX-100也是去污剂，甘露醇是糖类。

2.B.流式细胞术利用激光作为光源激发细胞内的荧光物质或散射光，通过光电倍增管等探测器检测散射光和荧光信号，实现细胞参数的测量和分选。显微镜成像观察形态，电镜观察超微结构，细胞培养是基础技术。

3.D.WesternBlotting中，蛋白质从凝胶转移到PVDF或NC膜的过程是利用电场驱动，带负电荷的蛋白质向正极移动，通过毛细作用穿过膜孔到达膜表面。

4.C.FACS利用荧光标记