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补肺纳肾丸通过调控PI3K/Akt信号通路介导的MMPs/TIMPs平衡减轻慢性阻塞性肺疾病中的细胞外基质沉积

摘要目的根据中医理论，慢性阻塞性肺疾病（ChronicObstructivePulmonaryDisease,COPD）可归属于“咳嗽”、“喘证”或“肺胀”范畴。补肺纳肾丸（BufeiNashenPill,BFNSP）是一种中药复方，既往研究表明，其可改善COPD患者的临床症状。然而，该药用于治疗COPD的作用机制尚不明确。本研究旨在探讨补肺纳肾丸对COPD的改善作用，并重点研究其是否通过调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（phosphatidylinositol3-kinase/proteinkinaseB,PI3K/Akt）信号通路介导的基质金属蛋白酶/组织抑制剂金属蛋白酶（matrixmetalloproteinases/tissueinhibitorsofmetalloproteinases,MMPs/TIMPs）平衡来发挥作用。方法采用液相色谱-质谱联用（liquidchromatography-massspectrometry,LC-MS）技术分析补肺纳肾丸及其含药血清的主要成分。通过烟熏联合脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）注射建立COPD大鼠模型，并给予不同剂量补肺纳肾丸进行干预。检测大鼠肺功能与肺组织病理变化；采用酶联免疫吸附测定法（enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA）检测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefluid,BALF）和血清中炎症因子及细胞外基质（extracellularmatrix,ECM）相关指标（如MMP-9,MMP-3,TIMP-1,透明质酸（hyaluronicacid,HA））的水平；采用免疫组化、逆转录-定量聚合酶链反应（reversetranscription-quantitativepolymerasechainreaction,RT-qPCR）和Westernblotting技术检测肺组织中I/III型胶原、层粘连蛋白以及PI3K/Akt通路关键分子和MMP-9、TIMP-1的表达。结果补肺纳肾丸能有效改善COPD大鼠肺功能，减轻肺组织病理损伤和炎症反应。更重要的是，它能显著降低肺组织和血清中MMP-9、MMP-3的水平，同时升高TIMP-1的表达，从而改善MMPs/TIMPs的失衡状态，减少胶原等细胞外基质成分的过度沉积。分子机制研究显示，补肺纳肾丸能抑制肺组织中PI3K、Akt的磷酸化水平。结论补肺纳肾丸可能通过抑制PI3K/Akt信号通路的过度激活，纠正MMPs/TIMPs平衡失调，进而减轻细胞外基质沉积，延缓COPD的疾病进展。

关键词：慢性阻塞性肺疾病；补肺纳肾丸；磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路；基质金属蛋白酶/组织抑制剂金属蛋白酶（MMPs/TIMPs）平衡；细胞外基质沉积

慢性阻塞性肺疾病（ChronicObstructivePulmonaryDisease,COPD）是一种以持续性、进行性气流受限为特征的常见呼吸系统疾病，其病理生理过程与气道及肺组织的慢性炎症反应增强密切相关。COPD发病率高，疾病负担重，严重危害人类健康[1,2]。在中国，COPD已成为威胁国民健康的第三大死亡原因，其公共卫生重要性不容忽视[3]。全球范围内，COPD的发病率和死亡率持续攀升，有预测表明，至2060年，全球每年因COPD及相关并发症死亡的人数将不低于540万[4]。目前，COPD的临床治疗药物主要包括糖皮质激素、抗炎药、抗氧化剂及支气管扩张剂等[5]。然而，这些常规治疗手段仅能在一定程度上控制呼吸道症状或延缓疾病进展，尚无法达到治愈水平，具有一定的局限性[6]。因此，探寻并开发能够有效干预COPD病理进程的新疗法，已成为当前研究的迫切需求。

在中医理论体系中，COPD的临床表现可归属于“咳嗽”、“喘证”或“肺胀”等病症范畴[7]。近年来，大量研究表明中医药在COPD治疗中取得了良好效果[8,9]。一项多中心随机对照试验证明，新加宣白承气汤是治疗COPD急性加重的有效方剂[10]。此外，现代药理学研究表明，中医药具有抗炎和抗氧化保护作用，这有利于抑制COPD患者的炎症反应[11]。因此，中药治疗COPD的作用机制值得深入研究。补肺纳肾丸（备案号：宁药制备字Z20240007000）由黄芪、黄精、肉苁蓉、续断、白术、防风、紫苏子、瓜蒌、葶苈子、丹参、骨碎补、细辛、紫苏叶、荆芥穗、地龙、蝉蜕和全蝎组成。诸药合用，共奏止咳化痰、补益肺肾之功[12]。既往研究已证明，补肺纳