高中生物：基因工程.pptVIP

第1页，共38页，星期日，2025年，2月5日基础理论

和技术的发展

催生了基因工程阅读课本第2页第2页，共38页，星期日，2025年，2月5日1.1DNA重组技术的基本工具是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的新的生物类型和生物产品分析概念：工具为什么要加工什么是表达用什么导入第3页，共38页，星期日，2025年，2月5日基因操作的工具基因的剪刀（分子手术刀）——限制性核酸内切酶（限制酶）基因的针线（分子缝合针）——DNA连接酶?基因的运输工具（分子运输车）——运载体

???到哪里去寻找这种酶第4页，共38页，星期日，2025年，2月5日（1）限制酶

???

①分布：主要在原核生物中。②作用特点:专一性，识别特定核苷酸序列，切割特定切点。??③结果：产生黏性未端和平末端

???④举例：EcoR1限制酶、Sma1限制酶???与我们学过的DNA酶相同吗？识别序列的特点作用是什么两者的区别这两种酶切的特点切断的是什么键第5页，共38页，星期日，2025年，2月5日限制酶的识别特点以中轴线双侧的DNA上碱基呈反向对称，重复排列如：GAATTCCCCGGGCTTAAGGGGCCC第6页，共38页，星期日，2025年，2月5日（2）DNA连接酶???

①连接的部位：磷酸和脱氧核糖之间的键：磷酸二酯键（梯子的扶手）②结果：两个相同的未端的连接。③举例：E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶??与DNA聚合酶相同吗二者在性质上的区别第7页，共38页，星期日，2025年，2月5日（3）运载体

???

①作用：将外源基因送入受体细胞。②具备的条件：能在宿主细胞内复制并稳定地保存。

???????????????具有多个限制酶切点。

???????????????具有某些标记基因对受体细胞无害

③举例：质粒、噬菌体和动植物病毒。

???为什么要具备这些条件第8页，共38页，星期日，2025年，2月5日1.2基因工程的基本操作程序为什么要获得目的基因为什么要把目的基因与载体结合受体细胞是指什么为什么要进行检测第9页，共38页，星期日，2025年，2月5日第一步：获取目的基因

方法：

1.从基因文库中获取目的基因。第10页，共38页，星期日，2025年，2月5日基因文库的构建模式图通过对受体菌的培养而储存基因第11页，共38页，星期日，2025年，2月5日第一步：获取目的基因

方法：

1.从基因文库中获取目的基因。2.利用PCR技术合成DNA

PCR:聚合酶链式反应.是以DNA变性、复制的某些特性为原理设计的.前提条件是必须对目的基因有一定的了解，需要设计引物。第12页，共38页，星期日，2025年，2月5日PCR原理图第13页，共38页，星期日，2025年，2月5日PCR的过程（1）以DNA片段作模板，在90℃高温下，分开成为单链DNA。

（2）以DNA小段寡聚核苷酸做引物，在50℃的温度下，找到可以配对的正链和负链，形成互补结合（3）在70℃高温下，合成一条与模板DNA单链（正链或负链）互补结合的DNA新链。

（4）以上三个步骤周而复始，即反应体系的温度从90oC-50oC-75oC，目的基因的量不断增加反应体系中经历：变性——淬火——合成——重复。结果：目的基因的量成指数形式扩增（2n)高温的作用是？引物是怎样获得的？四种脱氧核苷三磷酸（4XdNTP)酶高温DNA聚合酶（Taq酶），原料第14页，共38