高考高三生物PCR技术的应用复习.docx

PCR技术的应用

（一）基因克隆

1.利用特异引物，以cDNA或基因组DNA为模板获得已知的目的基因片段。

2.利用简并引物从cDNA文库或基因组文库中获得具有一定同源性的基因片段。

3.利用随机引物从cDNA文库或基因组文库中随机克隆基因。

4.与反转录反应相结合，直接从组织和细胞的mRNA获得目的基因片段。该方法被称为RT-PCR技术。

（二）基因的体外突变

利用PCR技术可以随意设计引物在体外进行基因的嵌和、缺失、点突变等改造。利用PCR技术构建重组体和突变体的方法称为重组PCR。利用两对引物可以非常容易地在DNA片段的任何位置进行点突变。

（三）DNA的微量分析

原位PCR是利用完整