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鼠伤寒沙门菌比色检测中适配体生物传感器的构建与性能研究

一、引言

1.1研究背景与意义

鼠伤寒沙门菌（SalmonellaTyphimurium）作为一种常见的革兰氏阴性食源性致病菌，广泛分布于自然界，对人类和动物的健康均构成了严重威胁。在人类中，鼠伤寒沙门菌主要通过摄入被污染的食物或水源传播，感染后通常会出现发热、腹泻、腹痛、呕吐等症状，严重时可导致脱水、败血症甚至死亡。特别是对于儿童、老年人、免疫功能低下者等易感人群，鼠伤寒沙门菌感染的危害更为显著。据世界卫生组织（WHO）相关统计数据显示，每年全球因食源性疾病导致的死亡病例中，相当一部分与鼠伤寒沙门菌感染有关。在一些卫生条件较差的地区，鼠伤寒沙门菌引发的腹泻疾病是导致婴幼儿死亡的重要原因之一。

在动物养殖领域，鼠伤寒沙门菌同样是一个不容忽视的问题。许多家畜、家禽如猪、鸡、牛等都容易感染鼠伤寒沙门菌。动物感染后，不仅会影响其生长发育、降低养殖效益，还可能通过食物链将病菌传播给人类。例如，在养猪业中，鼠伤寒沙门菌感染可导致仔猪出现腹泻、生长迟缓等症状，严重影响猪群的健康和养殖经济效益。同时，受感染猪的肉产品若未经严格检测和处理进入市场，就可能成为人类感染鼠伤寒沙门菌的潜在来源。

传统的鼠伤寒沙门菌检测方法主要包括微生物平板培养法、酶联免疫吸附法（ELISA）、聚合酶链反应（PCR）和基因测序技术等。微生物平板培养法作为检测的“金标准”，由于涉及细菌培养和平板计数，通常需要3-5天才能得到样品结果，检测周期长，难以满足快速检测的需求。ELISA虽然具有一定的灵敏度和特异性，但存在耗时的程序、繁琐的操作等问题。PCR技术对设备和技术人员熟练度要求较高，且容易出现假阳性结果。基因测序技术则成本高昂，不适用于大规模的常规检测。因此，开发一种快速、灵敏、简便、低成本的鼠伤寒沙门菌检测方法具有重要的现实意义。

适配体生物传感器作为一种新型的生物分析工具，结合了适配体的高特异性和生物传感器的快速、灵敏检测特性，为鼠伤寒沙门菌的检测提供了新的思路和方法。适配体是通过指数富集的配体系统进化技术（SELEX）从随机寡核苷酸文库中筛选得到的单链DNA或RNA分子，能够特异性地结合靶标分子，如蛋白质、小分子、细胞和病原体等。与传统的抗体相比，适配体具有易于合成和修饰、稳定性好、无免疫原性、靶标范围广等优点。将适配体作为识别元件构建生物传感器，能够实现对鼠伤寒沙门菌的高特异性检测，并且可以通过与各种信号转换技术相结合，如光学、电化学、压电等，实现对鼠伤寒沙门菌的快速、灵敏检测。因此，研究适配体生物传感器用于鼠伤寒沙门菌的比色检测，对于保障食品安全、公共卫生和动物健康具有重要的意义。

1.2国内外研究现状

在国外，适配体生物传感器用于鼠伤寒沙门菌检测的研究开展较早，取得了一系列的研究成果。[国外文献1]通过将鼠伤寒沙门菌适配体固定在金电极表面，结合电化学阻抗技术，构建了一种电化学适配体生物传感器，实现了对鼠伤寒沙门菌的快速检测，检测限达到了102CFU/mL。[国外文献2]利用纳米金标记的鼠伤寒沙门菌适配体，基于纳米金的颜色变化，建立了一种比色适配体生物传感器，该传感器能够在15分钟内实现对鼠伤寒沙门菌的可视化检测，检测限为103CFU/mL。[国外文献3]则将适配体与量子点相结合，通过荧光共振能量转移（FRET）原理构建了荧光适配体生物传感器，实现了对鼠伤寒沙门菌的高灵敏检测，检测限低至10CFU/mL。

在国内，适配体生物传感器用于鼠伤寒沙门菌检测的研究也受到了广泛关注。[国内文献1]制备了一种基于杂交链式反应（HCR）和纳米金比色的适配体生物传感器，该传感器通过HCR反应实现了信号放大，提高了检测灵敏度，对鼠伤寒沙门菌的检测限为102CFU/mL。[国内文献2]利用核酸适配体的特异性识别和滚环扩增（RCA）技术，构建了一种电化学适配体生物传感器，该传感器具有较高的灵敏度和特异性，可快速检测鼠伤寒沙门菌。[国内文献3]通过将鼠伤寒沙门菌适配体修饰在磁性纳米粒子表面，结合化学发光技术，建立了一种磁性化学发光适配体生物传感器，实现了对鼠伤寒沙门菌的快速、灵敏检测，检测限为10CFU/mL。

尽管国内外在适配体生物传感器用于鼠伤寒沙门菌检测方面取得了一定的进展，但目前的研究仍存在一些问题和挑战。例如，部分传感器的检测灵敏度和特异性有待进一步提高，传感器的稳定性和重复性需要优化，检测过程中可能受到样品基质的干扰等。因此，开发新型的适配体生物传感器，进一步提高其检测性能，仍然是该领域的研究热点和重点。

1.3研究内容与创新点

本研究旨在开发一种基于适配体的比色生物传感器，用于鼠伤寒沙门菌的快速、灵敏检测。具体研究内容