微生物学实验培养基制备和消毒灭菌.pptxVIP

微生物学实验培养基制备和消毒灭菌.pptx

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明确培养基配置原理;

掌握配制培养基普通方法和步骤;

了解高压蒸气灭菌基本原理、应用范围及高压蒸气灭菌操作方法;

学习棉塞制作等基本操作技术。;基本原理:

培养基中含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素,而NaCl提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作为凝固剂,琼脂在96℃时溶化,40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。;牛肉膏蛋白胨培养基配方;试验器材;操作步骤;在未调pH前,先用pH试纸测量培养基原始pH,假如偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入lmol/LNaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH,直至pH达7.6。反之,用lmol/LHCl进行调整。;4.过滤;6.加塞;8.灭菌;二、马丁氏培养基制备;马丁氏培养基配方;试验器材;操作步骤;三、高压蒸气灭菌;在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时,灭菌锅内冷空气排除是否完全极为主要,因为空气膨胀压大于水蒸气膨胀压,所以,当水蒸气中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸气温度低于饱和蒸气温度。;试验器材;操作步骤;4.用煤气加热,待冷空气完全排尽后,关上排气阀。当锅内压力升到所需压力时,控制热源,维持压力至所需时间。本试验用0.1Mpa,121.5℃,20min灭菌。

5.灭菌所需时间到后,关闭煤气,让灭菌锅内温度自然下降,当压力表降至“0时,打开排气阀,旋松螺栓,打开盖子,取出灭菌物品。

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