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各省PCR上岗证考试题库

姓名：__________考号：__________

题号

一

二

三

四

五

总分

评分

一、单选题(共10题)

1.PCR技术的基本原理是什么？()

A.酶联免疫吸附测定

B.聚合酶链反应

C.Southern印迹

D.Western印迹

2.PCR反应中，下列哪个物质不是反应必需的？()

A.引物

B.dNTPs

C.酶

D.水溶液

3.PCR反应的温度循环通常包括哪些步骤？()

A.预变性、变性、退火、延伸

B.变性、退火、延伸、循环

C.退火、延伸、变性、循环

D.预变性、变性、循环、延伸

4.PCR反应中，退火温度过高或过低会导致什么结果？()

A.反应特异性降低，非特异性扩增增加

B.反应特异性增加，非特异性扩增减少

C.反应速率加快，扩增产物增加

D.反应速率减慢，扩增产物减少

5.PCR产物经过电泳鉴定后，下列哪种方法可以进一步验证扩增片段的准确性？()

A.DNA测序

B.Southern印迹

C.Northern印迹

D.ELISA

6.PCR反应中，下列哪种因素会导致扩增失败？()

A.引物设计不合理

B.反应体系不合适

C.酶活性不足

D.以上都是

7.PCR反应中，如何避免非特异性扩增？()

A.使用高浓度引物

B.优化退火温度

C.使用高浓度的dNTPs

D.以上都是

8.PCR反应中，变性步骤的目的是什么？()

A.打开DNA双链

B.使引物结合到目标DNA上

C.激活DNA聚合酶

D.以上都是

9.PCR反应中，延伸步骤的温度通常是多少？()

A.90-95℃

B.50-60℃

C.70-75℃

D.30-40℃

10.PCR反应中，以下哪个因素不会影响反应的特异性？()

A.引物设计

B.退火温度

C.反应时间

D.dNTPs浓度

二、多选题(共5题)

11.PCR反应中，以下哪些因素会影响反应的特异性和灵敏度？()

A.引物设计

B.反应温度

C.酶的种类和活性

D.dNTPs的质量和浓度

E.模板DNA的质量和浓度

12.PCR反应结束后，以下哪些步骤是进行PCR产物分析的常见方法？()

A.电泳分析

B.DNA测序

C.Southern印迹

D.Northern印迹

E.ELISA

13.PCR反应中，以下哪些物质是反应的必需成分？()

A.引物

B.DNA模板

C.酶

D.dNTPs

E.PCR缓冲液

14.PCR反应中，以下哪些操作可能引起污染？()

A.使用同一套PCR管进行不同样品的反应

B.不更换手套操作PCR设备

C.使用未清洁的移液器进行操作

D.使用同一批次的引物进行多个样品的反应

E.以上都是

15.PCR反应中，以下哪些因素会影响扩增的效率？()

A.引物的Tm值

B.反应缓冲液的离子强度

C.酶的浓度

D.DNA模板的浓度

E.反应程序的设置

三、填空题(共5题)

16.PCR技术中，变性步骤的目的是将DNA双链分开，使其成为单链，以便于后续的什么步骤？

17.PCR反应中，dNTPs是合成新DNA链的原料，它们的全称是什么？

18.PCR反应的退火步骤中，引物与模板DNA的结合温度通常称为什么温度？

19.PCR反应中，为了提高反应的特异性和效率，通常需要优化哪些参数？

20.PCR反应中，如果扩增产物出现非特异性条带，可能的原因是什么？

四、判断题(共5题)

21.PCR反应中，变性步骤的温度应该比退火步骤的温度高。()

A.正确B.错误

22.PCR反应中，使用更高浓度的dNTPs可以提高扩增效率。()

A.正确B.错误

23.PCR反应中，引物的长度越短，反应的特异性越高。()

A.正确B.错误

24.PCR反应中，所有模板DNA都会被扩增。()

A.正确B.错误

25.PCR反应中，非特异性扩增是由于引物设计不当造成的。()

A.正确B.错误

五、简单题(共5题)

26.问：PCR技术的基本原理是什么？

27.问：在进行PCR实验时，如何避免污染？

28.问：为什么PCR反应需要使用引物？

29.问：PCR反应中，如何优化退火温度以提高反应的特异性和效率？

30.问：PCR反应结束后，如何进行扩增产物