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临床分离90株白假丝酵母菌的基因分型与药敏试验的关联性探究

一、引言

1.1研究背景与意义

白假丝酵母菌（Candidaalbicans）作为一种常见的条件致病性真菌，广泛存在于自然界以及人体的皮肤、口腔、肠道、阴道等黏膜表面。在正常生理状态下，人体的免疫系统能够有效抑制其过度繁殖，维持微生态平衡，使其与人体处于共生状态。然而，当机体免疫力下降，如因患有恶性肿瘤、艾滋病等严重疾病，长期使用免疫抑制剂、糖皮质激素，或者进行器官移植、放化疗等治疗手段时，白假丝酵母菌就可能趁机大量繁殖并侵袭组织，引发感染。此外，长期或不合理使用广谱抗生素，会破坏人体正常菌群的平衡，为白假丝酵母菌的生长提供有利条件，从而增加感染风险。

白假丝酵母菌感染可累及人体多个部位，引发多种疾病，给患者的健康和生活带来严重影响。皮肤和黏膜感染是较为常见的类型，例如口腔白假丝酵母菌病，多见于婴幼儿、老年人以及免疫功能低下者，表现为口腔黏膜表面覆盖白色斑膜，患者可出现疼痛、吞咽困难等症状，严重影响进食和生活质量；阴道白假丝酵母菌病则是女性常见的妇科疾病之一，主要症状包括阴道瘙痒、灼痛、白带增多且呈豆腐渣样，不仅会给患者带来身体上的不适，还可能对性生活和生殖健康造成不良影响。更为严重的是，在免疫系统严重受损的患者中，白假丝酵母菌可通过血液循环播散至全身，引起系统性感染，如白假丝酵母菌血症、心内膜炎、脑膜炎等，这些全身性感染往往病情凶险，治疗难度大，病死率高。据相关研究统计，白假丝酵母菌血症的病死率可高达30%-70%，给临床治疗带来了巨大挑战。

准确掌握白假丝酵母菌的基因分型，对于深入了解其传播途径、种群结构以及致病机制具有重要意义。不同基因分型的白假丝酵母菌在毒力、耐药性以及对宿主的侵袭能力等方面可能存在差异。通过基因分型技术，能够追踪感染源，明确传播链，有助于制定针对性的防控措施，有效预防和控制白假丝酵母菌感染的传播。例如，在医院感染防控中，通过对感染菌株进行基因分型，可以及时发现医院内的潜在传播源，采取相应的隔离和消毒措施，防止感染的扩散。此外，基因分型研究还可以为流行病学调查提供重要依据，帮助我们了解白假丝酵母菌在不同地区、不同人群中的分布规律和流行趋势。

药敏试验则是指导临床合理用药的关键环节。随着抗真菌药物的广泛应用，白假丝酵母菌的耐药问题日益严重。了解不同菌株对各种抗真菌药物的敏感性，能够帮助临床医生在治疗过程中精准选择药物，提高治疗效果，减少不必要的药物使用，降低耐药菌株的产生风险。合理的药敏试验结果可以避免盲目用药，减少药物不良反应的发生，同时也有助于优化治疗方案，缩短治疗周期，减轻患者的经济负担。例如，对于对氟康唑敏感的菌株，可优先选用氟康唑进行治疗；而对于耐药菌株，则需要及时调整用药方案，选择其他有效的抗真菌药物。因此，开展白假丝酵母菌的基因分型和药敏试验研究，对于提高临床治疗水平、降低感染发生率和病死率具有重要的现实意义。

1.2国内外研究现状

在白假丝酵母菌基因分型方法的研究方面，国内外取得了丰硕的成果。多位点酶电泳（MLEE）通过检测病原微生物的水溶性代谢酶，来反映基因位点的多态性，进而对菌株进行分型。然而，该方法操作较为繁琐，需要专业的技术人员和设备，且分辨率有限，在实际应用中存在一定的局限性。随机扩增多态性DNA（RAPD）技术以随机排列的寡核苷酸单链为引物扩增基因组DNA，具有操作简单、快速以及成本低的优点，不需要任何待测DNA的序列信息。但该技术的重复性较差，实验中的任何操作、相关试剂的用量以及人为因素等都可能会影响扩增的结果，且扩增反应的退火温度较低，易出现假带。扩增片段长度多态性（AFLP）和限制片段长度多态性（RFLP）技术通过对DNA进行酶切和扩增，分析片段长度的多态性来实现基因分型。这两种方法分辨率较高，但操作复杂，对实验条件要求严格，耗时较长，限制了其大规模应用。

脉冲场凝胶电泳（PFGE）被认为是基因分型的“金标准”，能够分离大片段DNA，具有较高的分辨率，可准确分析菌株之间的遗传关系。不过，该方法需要昂贵的设备，操作过程复杂，实验周期长，难以在常规实验室中广泛开展。微卫星长度多态性（MLP）根据微卫星区侧翼的单拷贝序列设计引物进行扩增，通过分析微卫星序列的长度变异来进行基因分型。该方法具有较高的灵敏度和特异性，但引物设计较为复杂，且对实验技术要求较高。多位点序列分型（MLST）通过对多个管家基因的序列进行分析，能够准确地确定菌株的基因型，具有重复性好、分辨率高、结果易于比较等优点，已成为目前白假丝酵母菌基因分型的常用方法之一。但MLST也存在一些缺点，如需要对多个基因进行测序，成本较高，数据分析相对复杂。

在药敏试验研究方面，