2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体 高二生物课件（人教版2019选择性必修3）.pptxVIP

二、动物细胞融合技术与单克隆抗体

1.你从视频中了解到单克隆抗体具有哪些特点？2.请你尝试解释一下“单克隆抗体”一词的含义。能准确识别抗原的特点。3.要制备单克隆抗体，就需要找到一种能分泌抗体且增殖能力强的细胞。什么细胞能产生抗体？什么细胞具有无限增殖的能力？（已免疫）B淋巴细胞能产生抗体肿瘤细胞能无限增殖

时间成果19世纪30年代观察到肺结核、天花、水痘、麻疹等疾病患者的病理组织有多核细胞1858年观察到正常组织、发炎组织以及肿瘤组织中的多核细胞现象。1875年第一个观察到脊椎动物（蛙类）的血液细胞发生融合的过程。1876年在无脊椎动物中发现了细胞合并现象。1962年日本学者冈田发现仙台病毒具有触发动物细胞融合的效应。1965年英国科学家证实了灭活的病毒可诱发动物细胞融合1974年华裔加拿大学者高国楠创立了聚乙二醇（PEG）化学融合法。1975年Kohler和Milstein成功地融合了小鼠B-淋巴细胞和骨髓瘤细胞而产生能分泌稳定单克隆抗体的杂交瘤细胞。20世纪80年代发展出了电融合技术(1985年酵母原生质体电融合)动物细胞融合技术的发展历史

动物细胞融合动物细胞培养一.动物细胞融合技术1.概念：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。2.结果：形成的具有原来两个或多个细胞的。3.原理：4.诱导融合方法：杂交细胞遗传信息细胞膜具有一定的流动性物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活病毒诱导法与植物原生质体融合的方法相同——动物细胞融合特有思考.“灭活病毒”中灭活的具体含义是什么？灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。

动物细胞融合动物细胞培养6.意义：突破了的局限，使成为可能。有性杂交远缘杂交5.动物细胞融合的过程：细胞膜融合细胞核融合细胞质融合细胞融合的实质（标志）7.应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段，为制造单克隆抗体开辟了新途径。一.动物细胞融合技术诱导融合后的细胞一定具有双方的遗传信息吗？为什么？不一定，诱导A、B两种细胞融合，融合后可能有A、B未融合细胞及AA、AB、BB等多种细胞，因此细胞融合后需要进行筛选。

比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合基本原理融合前处理诱导方法用途意义细胞膜的流动性、植物细胞的全能性细胞膜的流动性用纤维素酶、果胶酶去壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散培育新品种制备单克隆抗体物理法：电融合法、离心法化学法：PEG融合法，高Ca2+-高PH融合法电融合法，PEG融合法，灭活的病毒植物体细胞杂交和动物细胞融合比较打破生殖隔离，实现远缘杂交育种突破有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能

(1)与植物原生质体融合相比，动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒()(2)灭活的含义是用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构()(3)二倍体动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞()×√×1.右图为细胞融合的示意图，下列叙述正确的是()A．若a细胞和b细胞是植物细胞，需先去分化再诱导融合B．a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现C．c细胞的形成与a、b细胞膜的选择透过性都有关D．c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因B

2.如图表示仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程，下列正确的是（）A.细胞A和细胞B必须为同种细胞才能融合B.细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质C.该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性D.此过程的原理是动物细胞具有全能性B3.对比动物细胞融合和植物体细胞杂交技术，下列论述合理的是（）A.均可使用PEG、电融合或灭活病毒诱导细胞融合B.两者都可以跨越种属间的生殖隔离C.两者都可以体现细胞的全能性D.在适宜的条件下，均可产生完整个体B

缺陷：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。不能无限增殖产生大量抗体动物体内抗原刺激浆细胞抗体筛选单一B细胞增殖分化所处环境抗原不纯体内产生的特异性抗体多达百万种如何解决这个问题呢？二.单克隆抗体1.早期获得抗体的方法：

12（1）基本原理动物细