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探究结核患者γδTCR中δ1、δ2基因重排与CDR3谱型特征及其免疫关联

一、引言

1.1研究背景

结核病是一种严重危害人类健康的全球性公共卫生问题，由结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis，MTB）感染引起。据世界卫生组织（WHO）报告，全球约三分之一的人口感染了MTB，每年有新增结核病患者约1000万，导致约150万人死亡。在中国，结核病也是一个重大的公共卫生挑战，患者人数众多，给社会和个人带来了沉重的负担。MTB作为胞内寄生菌，其免疫主要是以CD4+Th1细胞为主的细胞免疫，T细胞在识别抗原和启动免疫反应中起着关键作用。

γδT细胞是T细胞的一个独特亚群，约占外周血T细胞的5%，在黏膜免疫、皮肤免疫和抗感染免疫中发挥重要作用。γδT细胞具有快速反应和非MHC限制性识别抗原的特点，能够识别多种病原体相关分子模式（PAMPs）和应激相关分子，在天然免疫和适应性免疫之间起到桥梁作用。在结核感染中，γδT细胞能够被MTB抗原活化，迅速分泌细胞因子如IFN-γ、TNF-α等，参与免疫调节和抗菌防御，同时也具有直接杀伤感染MTB的靶细胞的能力。

γδT细胞的功能主要依赖于其表面的γδT细胞受体（γδTCR）。γδTCR由γ链和δ链组成，这两条链分别由Vγ-Jγ-Cγ及Vδ-Dδ-Jδ-C6基因片段重排后编码，由此构成了具有不同特异性的γδTCR分子。TCR重排过程中，V-(D)-J的基因片段进行重排并随机插入核苷酸形成一高度可变区，成为互补决定区3（CDR3），CDR3是TCR与抗原结合的关键区域，其序列的多样性决定了TCR对抗原识别的特异性。在结核感染过程中，γδTCR如何重排以识别MTB抗原，以及其CDR3谱型的变化规律，对于理解γδT细胞在结核免疫中的作用机制至关重要，但目前相关研究仍不够深入。

1.2研究目的与意义

本研究旨在深入剖析结核患者γδTCR中δ1、δ2基因重排特点及CDR3谱型，以期揭示γδT细胞在结核感染与免疫中的作用机制。通过分析结核患者γδTCR的基因重排特点，能够明确参与结核免疫应答的γδT细胞亚群及其特异性，进一步理解γδT细胞如何识别MTB抗原，为结核免疫机制的研究提供新的视角。对CDR3谱型的分析可以了解γδT细胞克隆性增殖情况和免疫应答的广度与深度，有助于发现针对MTB的特异性γδT细胞克隆，为结核的诊断、治疗和预防提供潜在的生物标志物和治疗靶点。

在结核病的防治方面，本研究成果具有重要的应用价值。如果能够确定结核特异性的γδTCR序列和CDR3谱型特征，有望开发基于γδT细胞的新型诊断方法，提高结核诊断的准确性和敏感性，尤其是对于早期感染和耐药结核的诊断。从治疗角度看，这些研究结果可以为免疫治疗提供理论基础，例如通过激活或扩增特异性γδT细胞来增强机体对MTB的免疫应答，开发新型的免疫治疗策略；也可能为结核疫苗的设计提供新思路，提高疫苗的免疫原性和保护效果。因此，本研究对于深入理解结核免疫机制，推动结核病的精准防治具有重要的科学意义和临床应用价值。

二、γδTCR与结核病相关理论基础

2.1γδT细胞与γδTCR概述

2.1.1γδT细胞的特性与功能

γδT细胞是T细胞中的一个特殊亚群，与占主导地位的αβT细胞在诸多方面存在差异。在免疫细胞的大家庭中，γδT细胞凭借其独特的特性，在免疫防御体系里占据着不可或缺的位置。从细胞发育的角度来看，γδT细胞在骨髓中生成，随后迁移至胸腺进行成熟。与αβT细胞发育依赖胸腺上皮细胞呈递的自身肽-MHC分子不同，γδT细胞的发育有着自身独特的机制，这也为其后续展现出的独特功能奠定了基础。

在抗原识别方面，γδT细胞可谓独树一帜。传统的αβT细胞识别抗原时，需要抗原呈递细胞（APC）将抗原处理成小肽段，并与主要组织相容性复合体（MHC）分子结合后呈递给T细胞，即受到MHC的严格限制。而γδT细胞的T细胞受体（TCR）能够直接识别多种抗原，无需MHC分子的呈递，这种非MHC限制性的抗原识别方式，使得γδT细胞能够对病原体相关分子模式（PAMPs）和应激相关分子迅速做出反应。例如，当机体遭受细菌感染时，γδT细胞可以识别细菌产生的异戊二烯焦磷酸盐（IPP）及其类似物等非肽类抗原，而这些抗原往往难以被αβT细胞所察觉。

γδT细胞在免疫应答中具有快速反应的特点。一旦识别到抗原，γδT细胞能够迅速活化，在短时间内启动免疫反应，相较于αβT细胞，其反应