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生物科学课程实验题解答指南及参考答案

一、选择题（每题2分，共20题）

说明：本题型考查基础实验原理与操作规范，侧重国内高等院校生物科学专业常用实验技术。

1.在PCR实验中，下列哪项是引物退火温度的主要影响因素？

A.引物长度

B.GC含量

C.退火时间

D.模板浓度

答案：B

解析：引物退火温度与GC含量正相关，GC含量越高，Tm值越大，退火温度需相应提高。

2.纤维素酶和半纤维素酶在植物细胞壁降解中的作用关系是？

A.半纤维素酶先作用，纤维素酶后作用

B.两者同时作用，无先后顺序

C.纤维素酶先作用，半纤维素酶后作用

D.两者仅单独作用于特定层

答案：A

解析：半纤维素酶先降解半纤维素，暴露纤维素微纤丝，再由纤维素酶作用。

3.下列哪项不属于琼脂糖凝胶电泳的缓冲液成分？

A.Tris-HCl

B.甘氨酸

C.硫酸钠

D.硼酸

答案：C

解析：琼脂糖凝胶常用Tris-醋酸缓冲液或TBE缓冲液，含甘氨酸、硼酸，不含硫酸钠。

4.在动物细胞培养中，CO?培养箱的主要作用是？

A.提供无菌环境

B.调节pH值至7.2-7.4

C.促进细胞增殖

D.防止杂菌污染

答案：B

解析：CO?溶于水形成碳酸氢盐缓冲体系，维持pH稳定。

5.下列哪项是Southernblotting技术的主要步骤？

①DNA电泳分离②转膜③探针杂交④结果显影

A.①②③④

B.②①③④

C.③①②④

D.④③②①

答案：A

解析：Southernblotting标准流程为电泳→转膜→杂交→显影。

6.在微生物平板划线分离实验中，划线的目的是？

A.增加菌落数量

B.均匀分布菌种

C.纯化单一菌落

D.观察菌落形态

答案：C

解析：通过多次划线稀释细菌，最终获得单个菌落。

7.下列哪项是酶活性测定中常用的底物？

A.葡萄糖酸

B.茚三酮

C.2,6-二氯靛酚

D.硝基四氮唑蓝

答案：D

解析：硝基四氮唑蓝（NBT）用于测定NADH氧化酶活性。

8.在动物组织切片制作中，下列哪项是脱水步骤？

A.乙醇梯度浸泡

B.油替代品处理

C.蜡封渗透

D.脱水后直接包埋

答案：A

解析：脱水常用乙醇或丙酮梯度逐步替代组织水分。

9.下列哪项是基因芯片的主要应用领域？

A.单克隆抗体制备

B.蛋白质组学分析

C.基因表达谱检测

D.DNA测序

答案：C

解析：基因芯片通过杂交检测大量基因表达水平。

10.在微生物计数中，平板菌落计数法适用于？

A.高浓度菌液

B.稀释倍数不明确

C.需要定量培养

D.无法使用显微镜计数

答案：C

解析：平板计数法适用于定量分析，通过菌落数推算原始浓度。

二、填空题（每空1分，共10题）

说明：本题型考查实验关键试剂、仪器参数及操作要点，结合国内生物实验常规设置。

1.在蛋白电泳中，SDS的原理是利用______使蛋白质变性并带负电荷，按分子量分离。

答案：十二烷基硫酸钠（SDS）

2.红细胞沉降率测定中，常使用______法计算血液粘度。

答案：维氏粘度计

3.植物组织培养中，MS培养基的主要成分包括硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、甘氨酸、______和蔗糖。

答案：肌醇

4.纤维素酶水解纤维素的最终产物是______和木糖。

答案：葡萄糖

5.在ELISA实验中，酶标板清洗常用______缓冲液，洗脱次数一般为3-5次。

答案：PBS-T（含吐温20）

6.细胞计数中，血球计数板分为______和中央计数室两部分。

答案：四角计数室

7.PCR扩增过程中，通常需要设置______个引物，分别对应模板链的3端和5端。

答案：2

8.植物切片制作中，______染料常用于观察细胞核和质体。

答案：苏木精

9.基因枪法转化的关键步骤包括______、轰击和转化后筛选。

答案：制备微弹

10.红细胞渗透脆性试验中，高渗溶液的作用是______。

答案：检测红细胞膜对低渗液抵抗力

三、简答题（每题5分，共5题）

说明：本题型考查实验原理、步骤及结果分析，结合国内高校实验项目。

1.简述琼脂糖凝胶电泳的原理及适用范围。

答案：

-原理：利用带电分子在电场中泳动，根据分子大小和电荷差异分离。琼脂糖凝胶为网状结构，孔径较大，适用于分离DNA片段（通常100bp-20kb）。

-适用范围：基因片段分析、PCR产物鉴定、质粒提取检测等。

2.为什么动物细胞培养需在CO?培养箱中进行？

答案：

-CO?（约5%）溶于培养基形成碳酸氢盐缓冲体系，维持pH7.2-7.4，避免细胞代谢产物导致pH下降；同时CO?有助于维持培养箱温度均匀。

3.简述植物