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发酵工程试题及详细答案

一、名词解释（每题5分，共25分）

发酵

种子扩大培养

临界溶氧浓度

分批发酵

培养基优化

二、选择题（每题3分，共15分）

下列哪种微生物不适用于工业发酵生产抗生素（）

A.青霉素菌B.大肠杆菌C.头孢霉菌D.链霉菌

发酵过程中，调节pH值的常用方法不包括（）

A.添加酸碱溶液B.补加碳源或氮源C.通入无菌空气D.加入缓冲溶液

种子扩大培养的核心目的是（）

A.获得大量纯种微生物B.筛选高产菌株C.去除杂菌D.降低生产成本

下列关于连续发酵的特点，说法错误的是（）

A.发酵稳定，易于自动化控制B.产物浓度较低C.发酵周期长D.设备利用率高

发酵罐的搅拌装置主要作用不包括（）

A.混合均匀B.破碎气泡C.调节温度D.增加溶氧

三、简答题（每题10分，共30分）

简述发酵过程中溶氧浓度的影响因素及控制方法。

说明种子扩大培养的工艺流程及各阶段的关键控制点。

比较分批发酵、补料分批发酵和连续发酵的优缺点。

四、论述题（每题30分，共30分）

某工厂拟进行谷氨酸的工业化发酵生产，试从菌株选择、培养基设计、发酵工艺控制（温度、pH、溶氧、泡沫）及下游提取初步方案等方面，设计一套完整的发酵生产方案。

参考答案

一、名词解释（每题5分，共25分）

发酵：广义上指利用微生物在有氧或无氧条件下的代谢活动，将原料转化为有用产物的过程；狭义上特指微生物的无氧呼吸过程。工业上多采用广义定义，核心是通过调控微生物代谢，实现目标产物的高效合成与积累。

种子扩大培养：指将实验室培养的少量纯种微生物，通过一系列逐步扩大的培养过程，获得足量、健壮、符合发酵要求的种子菌液的过程。其目的是保证发酵罐内有足够的菌体浓度，缩短发酵延迟期，提高发酵效率。

临界溶氧浓度：指微生物生长和代谢活动所需的最低溶氧浓度。当发酵液中溶氧浓度低于该值时，微生物的生长速率和产物合成速率会显著下降；高于该值时，溶氧浓度不再成为微生物生长和产物合成的限制因素。

分批发酵：指将发酵原料一次性投入发酵罐，接种微生物后，在设定的工艺条件下进行发酵，直到发酵结束后一次性收获产物的发酵方式。发酵过程中，营养物质逐渐消耗，产物不断积累，微生物浓度先增后稳。

培养基优化：指根据微生物的营养需求和发酵目标，通过实验设计（如单因素实验、正交实验、响应面法等），调整培养基中各成分的种类、比例和浓度，以提高微生物生长速率和目标产物合成效率的过程。

二、选择题（每题3分，共15分）

答案：B解析：大肠杆菌主要用于生产重组蛋白、氨基酸等，而抗生素多由真菌（如青霉素菌、头孢霉菌）和放线菌（如链霉菌）生产。

答案：C解析：通入无菌空气主要作用是提供氧气和搅拌混合，不能直接调节pH；添加酸碱溶液可快速调节pH，补加碳源（降低pH）或氮源（提高pH）可间接调节pH，缓冲溶液可维持pH稳定。

答案：A解析：种子扩大培养的核心是获得大量符合发酵要求的纯种微生物，为发酵罐接种提供足够的菌体；筛选高产菌株属于发酵前的菌株选育阶段，去除杂菌是无菌操作的目的。

答案：C解析：连续发酵的特点是发酵稳定、易于自动化控制，设备利用率高，但产物浓度较低，发酵周期短（可长期连续运行）；分批发酵的发酵周期相对较长。

答案：C解析：发酵罐搅拌装置的主要作用是混合均匀发酵液、破碎气泡增加气液接触面积、提高溶氧浓度；调节温度主要依靠夹套或蛇管的加热/冷却系统。

三、简答题（每题10分，共30分）

答：发酵过程中溶氧浓度的影响因素及控制方法如下：

（1）影响因素：①微生物自身因素：微生物的种类、生长阶段和呼吸强度，呼吸强度越高，耗氧速率越快，溶氧浓度下降越快；②发酵液性质：发酵液的黏度、温度、pH值等，黏度越大，氧气传递阻力越大，溶氧浓度越低；温度升高，氧气溶解度降低；③设备参数：搅拌转速、通气量，搅拌转速越高、通气量越大，氧气传递效率越高，溶氧浓度越高；④泡沫：过多泡沫会增加气液接触阻力，降低溶氧传递效率。（6分）

（2）控制方法：①调节通气量：通过增加或减少无菌空气的通入量，直接改变发酵液中的氧气供给；②调节搅拌转速：提高搅拌转速可增强混合效果，破碎气泡，增大气液接触面积，提高溶氧传递效率；③控制发酵液黏度：通过补加无菌水或调节碳源浓度，降低发酵液黏度，减少氧气传递阻力；④调节温度：适当降低温度可提高氧气溶解度，增加溶氧浓度；⑤消除泡沫：使用消泡剂（如天然油脂、聚醚类消泡剂）或机械消泡装置，减少泡沫对溶氧传递的影响；⑥优化微生物代谢：通过控制碳源供给速率，调节微生物生长速率和呼吸强度，避免耗氧速率过高导致溶氧不足。（4分）

答：种子扩大培养的工艺流程及各阶段关键控制点如下：

（1）工艺