洁净区(室)沉降菌测试操作规程.docVIP

XXX-XX-XX-000洁净区（室）沉降菌测试操作规程PagePAGE6of8

操作标准

文件名称

洁净区（室）沉降菌测试操作规程

起草人

起草日期

年月日

审核人

审核日期

年月日

质量部审核人

审核日期

年月日

批准人

批准日期

年月日

颁发部门

质量部

生效日期

年月日

分发部门

总经理[]份质量部[]份生产部[]份EHS管理部[]份

工程部[]份物资部[]份动物实验室[]份中药提取车间[]份

商务部[]份仓储[]份药物警戒部[]份质量控制实验室[]份

财务部[]份行政部[]份技术研发部[]份大容量注射剂车间[]份

变更内容

修订号修订原因与内容执行日期

01年月日

1目的

建立洁净区沉降菌测试的操作规程，确保实验结果的准确性。

2适应范围

本标准适用于洁净区和洁净室、无菌室或局部空气净化区域（包括洁净工作台）沉降菌的测试。

3引用标准

医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法GB/T16294-2010

药品生产质量管理规范及附录（无菌药品）

4职责

质量控制实验室化验员：负责该操作规程的起草

质量控制实验室主任：负责该操作规程的审核

质量部经理：负责该操作规程的批准

5定义

5.1洁净室（区）对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区域，其建筑结构、装备及其使用均具有减少对该区域内污染源的介入，产生和滞留的功能。

5.2洁净工作台一种工作台或者与之类似的一个封闭围档工作区。其特点是自身能够供给经过过滤的空气或气体，如垂直层流罩，水平层流罩，垂直层流洁净工作台、水平层流洁净工作台、自净器等。

5.3洁净度洁净环境内单位体积空气中含大于或等于某一粒径的悬浮粒子的允许统计数。

5.4菌落微生物培养后，由一个或几个细菌繁殖而成的微生物集落，简称cfu。通常用个数表示。

5.5沉降菌用本标准提及的方法收集到的活微生物粒子，通过专用的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。

5.6单向流（曾称为层流）沿着平行流线，以单一通路以一定流速向单一方向流动的气流。

5.7非单向流（曾称为乱流）具有多个通路循环特性或气流方向不平行的，不满足单向流定义的气流。

5.8静态测试洁净室（区）净化空气调节系统已处于正常运行状态，工艺设备已安装，洁净室（区）内没有生产人员的情况下进行的测试。

5.9动态测试洁净室（区）已处于正常生产状态下进行的测试。

6内容

6.1测试方法

6.1.1方法概述

本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间（单个碟的暴露时间可以少于4小时，同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测并累积计数）在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。

6.1.2所用的仪器和设备

——生化培养箱：必须定期对培养箱的温度计进行检定。

——培养皿：采用φ90mm×15mm的硼硅酸玻璃培养皿。

——培养基：胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）。其配制方法见附录A。

——脉动真空灭菌器。

6.2测试步骤

6.2.1所有物品按《监测用物品进出洁净区标准操作规程》要求传入洁净区（室）。

6.2.2测试人员按《人员进出生产区管理规程》要求进入洁净室。

6.2.3将培养基平皿按采样点规定逐一放置，打开盖轻靠在培养皿边缘上，使培养皿表面暴露在空气中（静态测试时30分钟以上；动态测试时不大于4小时，适时更换培养皿）；采样结束后，再将培养皿盖逐一盖上，用记号笔标上编号后倒置放置，注意培养皿放置的顺序要先放先收，以免暴露时间长短不同影响结果。

6.2.4培养

——全部采样结束后，将培养皿倒置于生化培养箱中培养。

——在30℃～35℃培养箱（TSA）中培养不少于3天。

——每次测试时培养基平板应有对照试验，检验培养基在运输或搬动过程造成的影响。

6.2.5菌落计数

——用肉眼直接计数，然后用5～10倍放大镜检查，有否遗漏。

——若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。

6.3注意事项

——测试用具要作灭菌处理，保证测试的可靠性、正确性。

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