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Cre-lox重组系统删除效率试题库及答案.doc

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Cre-lox重组系统删除效率试题库及答案

一、单项选择题(每题2分,共10题)

1.Cre酶的本质是()

A.核酸B.蛋白质C.多糖D.脂类

2.loxP位点长度是()

A.34bpB.44bpC.54bpD.64bp

3.Cre-lox系统来源于()

A.大肠杆菌B.噬菌体C.酵母菌D.哺乳动物细胞

4.以下哪种条件下Cre酶活性较高()

A.低温B.高温C.生理温度D.超高温

5.若要在特定组织中实现基因删除,可选择()

A.组成型启动子驱动CreB.组织特异性启动子驱动Cre

C.诱导型启动子驱动CreD.随机启动子驱动Cre

6.Cre-lox重组系统中,两个loxP位点方向相同会发生()

A.倒位B.缺失C.易位D.重复

7.Cre酶识别loxP位点的哪个部分()

A.外侧臂B.核心序列C.整个位点D.随机识别

8.提高Cre酶表达量,删除效率通常会()

A.不变B.降低C.升高D.不确定

9.构建Cre转基因小鼠时,常用的载体是()

A.病毒载体B.质粒载体C.人工染色体D.噬菌体载体

10.Cre-lox系统可用于()

A.基因敲除B.基因过表达C.蛋白质纯化D.细胞分选

二、多项选择题(每题2分,共10题)

1.影响Cre-lox重组系统删除效率的因素有()

A.Cre酶表达量B.loxP位点完整性C.细胞类型D.培养条件

2.Cre-lox系统的应用场景包括()

A.基因功能研究B.疾病模型构建C.药物研发D.作物育种

3.以下关于loxP位点说法正确的是()

A.由两个13bp的反向重复序列和8bp的核心序列组成

B.核心序列决定重组方向

C.突变核心序列可能影响重组

D.两侧反向重复序列相同

4.Cre酶的特性有()

A.特异性识别loxP位点B.催化重组反应C.具有物种特异性D.可在多种细胞中发挥作用

5.可用于检测Cre-lox系统删除效率的方法有()

A.PCRB.WesternblotC.荧光定量PCRD.免疫组化

6.构建Cre表达载体时需要考虑的元件有()

A.启动子B.终止子C.筛选标记D.多克隆位点

7.在哺乳动物细胞中使用Cre-lox系统的优势有()

A.特异性强B.可时空控制C.操作简单D.效率高

8.Cre-lox系统与其他重组系统相比,特点包括()

A.更精准B.适用范围广C.可重复性好D.对细胞毒性小

9.以下哪些细胞类型可应用Cre-lox系统()

A.神经元细胞B.肝细胞C.心肌细胞D.造血干细胞

10.优化Cre-lox系统删除效率的策略有()

A.优化Cre酶密码子B.增加loxP位点拷贝数C.联合其他技术D.改变培养环境

三、判断题(每题2分,共10题)

1.Cre酶只能识别天然的loxP位点。()

2.loxP位点在基因组中位置不影响重组效率。()

3.诱导型Cre系统可随时控制基因删除时间。()

4.提高Cre酶稳定性能一定程度提高删除效率。()

5.Cre-lox系统只能用于基因删除,不能用于基因整合。()

6.不同物种细胞对Cre酶的耐受性相同。()

7.构建Cre转基因动物时,所有细胞都会表达Cre酶。()

8.两个loxP位点方向相反会导致基因倒位。()

9.检测删除效率只能通过分子生物学方法。()

10.优化载体设计对Cre-lox系统删除效率无影响。()

四、简答题(每题5分,共4题)

1.简述Cre-lox重组系统的基本原理。

答:Cre酶特异性识别loxP位点,当两个loxP位点方向相同时,Cre酶催化两个位点间DNA序列发生缺失;方向相反时发生倒位,从而实现对特定DNA片段的操作。

2.列举三种提高Cre-lox系统删除效率的方法。

答:一是优化Cre酶表达载体,增强Cre酶表达量;二是保证loxP位点完整性和正确构型;三是选择合适细胞类型,优化培养条件以利于Cre

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